Научная электронная библиотека
Монографии, изданные в издательстве Российской Академии Естествознания
Часть 3. ПРЕПАРАТЫ, ПРИМЕНЯЕМЫЕ ПРОТИВ РИККЕТСИОЗНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
Эпидемический сыпной тиф и волынская лихорадка
Возбудитель эпидемического сыпного тифа - Rickettsia prowazekii относится к роду Rickettsiae и возбудитель волынской лихорадки -
Rochalimea quintana относится к роду Rochalimea и входят в одноименную группу 9 (Риккетсии) по классификатору Берджи.
Риккетсии являются облигатными паразитами. Клетки полиморфны, грамотрицательны, спор и капсул не образуют, неподвижны.
Риккетсии относятся к медленно растущим организмам. Время генерации не менее 8- часов. Аэробы.
Для культивирования риккетсий применяют те же методы, что и для вирусов: заражение культуры тканей, развивающихся куриных эмбрионов, экспериментальных животных или эктопаразитов.
Имеют два антигена: растворимый (группоспецифический) и корпускулярный (видоспецифический).
В клетке хозяина риккетсии локализуются в цитоплазме.
Риккетсии образуют токсические вещества, природа которых окончательно не установлена. Они нестойки, легко разрушаются, обладают гемолитической активностью и вызывают парез кровеносных сосудов.
Эпидемический сыпной тиф и волынская лихорадка - антропонозные, трансмиссивные инфекции. Эпидемический сыпной тиф распространен повсеместно, а волынская лихорадка - природно-очаговая инфекция.
Риккетсии поражают клетки ретикулоэндотелиальной системы и эндотелия сосудов. В основе патогенеза лежит интоксикация и развитие характерных изменений в эндотелии артериол и капилляров в виде эндоваскулита. Как следствие, возникают тромбозы, стазы и кровоизлияния в различных органах и тканях, в том числе ЦНС.
Клиника характеризуется выраженной интоксикацией и геморрагиями. Смерть наступает в результате развития острой сердечной недостаточности и поражения ЦНС.
Постинфекционный иммунитет - длительный, стойкий.
Микробиологическая диагностика риккетсиозов основана на серологическом исследовании (РА, РПГА, РСК с соответствующими риккетсиозными диагностикумами). Выделение риккетсий возможно только в специальных лабораториях строгого режима.
Для этиотропной терапии используют антибиотики.
Специфическая профилактика сыпного тифа проводится по эпидемиологическим показаниям живой или химической сыпнотифозной вакциной. Для волынской лихорадки специфическая профилактика не разработана.
Сухая живая комбинированная сыпнотифозная вакцина Е (сухая ЖКСВ-Е)
Препарат представляет собой высушенную в стерильном молоке взвесь яичной культуры риккетсий Провачека (штамм Мадрид Е) в комбинации с инактивированным растворенным антигеном из вирулентного штамма (Брейнль) риккетсий Провачека. Штамм Мадрид Е, используемый для приготовления вакцины, морфологически типичен, хорошо размножается в куриных эмбрионах. В разведении 10-2 он вызывает гибель эмбрионов к 6-7 дню; в них обнаруживается большое количество риккетсий.
Серологически они полностью соответствуют риккетсиям Провачека, однако вирулентность их снижена. В разведении 10-2 они не вызывают инфекции у морских свинок, но создают у них хорошо выраженный иммунитет.
Штамм Брейнль - типичный вирулентный штамм риккетсий. Из него получают растворимый антиген-эфирный лизат, дополнительно очищенный от балластных белков центрифугированием. ЖКСВ-Е - апатогенна.
Одна прививочная доза содержит 3-4 минимальных инфицирующих доз для эмбриона (МИДЭ) живых риккетсий и 16 антигенных единиц, установленных в РСК, растворимого антигена. Вакцина контролируется на стерильность обычным способом, безвредность для морских свинок, иммуногенность. Она считается иммуногенной в том случае, если у морских свинок обнаруживается полный иммунитет, предохраняющий их от развития инфекции (отсутствие лихорадочной и скротальной реакции) при заражении вирулентной культурой риккетсий через 30 дней после введения вакцины.
Прививкам подвергают лиц в возрасте от 16 до 60 лет. Препарат предназначен для создания активного иммунитета против сыпного тифа. Применяется он однократно, подкожно, в дозе 0,25 мл. Ревакцинация производится не ранее чем через 2 года после прививки, лицам с отрицательными результатами реакции связывания комплемента. Вакцина не сочетается с другими прививками, которые могут проводится не ранее чем через месяц после прививки ЖКСВ-Е или за 1 месяц до нее.
Прививки ЖКСВ-Е надлежит проводить по эпидемиологическим показаниям только в тех случаях, когда трудно осуществимы обычные мероприятия по ликвидации очагов сыпного тифа.
Срок годности вакцины неограничен.
Сухая химическая сыпнотифозная вакцина
Для профилактики сыпного тифа может быть использована химическая сыпнотифозная вакцина, действующим началом которой является высушенная в вакууме иммуногенная субстанция, полученная путем химической обработки из поверхностной оболочки риккетсий Провачека. В производстве вакцины используется вирулентный штамм риккетсий Провачека, хорошо размножающийся в желточных мешках куриных эмбрионов и вызывающий их гибель к 5-8 дню после заражения.
Вирулентность производственного штамма определяется на морских свинках, белых мышах, платяных и головных вшах. При внутрибрюшинном заражении у морских свинок возникает циклически протекающее заболевание с последующим образованием антител против риккетсий. У белых мышей, после интраназального введения риккетсий, развивается пневмония с обильным накоплением риккетсий в легких. У головных и платяных вшей экспериментальное заражение приводит к развитию смертельной инфекции, при которой в эпителии кишечника обнаруживается большое количество риккетсий. Из взвеси риккетсий, размножившихся в желточных мешках, путем осаждения сернокислым аммонием выделяется в чистом виде иммунизирующее вещество. Оно и служит для приготовления вакцины.
Вакцина проверяется на стерильность и безвредность обычным способом. Титр вакцины определяется в реакции связывания комплемента; одна прививочная доза ее (1 мл) должна содержать не менее 32 антигенных единиц. Иммуногенность препарата считается достаточной, если у морских свинок после введения вакцины развивается устойчивость к 10000 минимальных инфицирующих для вирулентной культуры риккетсий. Вакцина вводится подкожно, однократно в дозе 1 мл. Последующие ревакцинации производятся не ранее чем через 1 год.
Срок годности сухой вакцины - 5 лет.
Концентрированный антиген из риккетсий Провачека, культивированных в кишечниках зараженных вшей,
для диагностики сыпного тифа
Препарат применяется для специфической серологической диагностики сыпного тифа в реакциях макроагглютинации и РСК.
Действующим началом диагностикума являются инактивированные формалином (0,5 %) риккетсии Провачека, выделенные от больных сыпным тифом и культивированные на взрослых вшах, свободных от посторонней микрофлоры.
Препарат содержит в 1 мл 50-60 кишечников зараженных вшей, что соответствует 3-5 млрд. риккетсий Провачека; он безвреден для морских свинок и вшей, не содержит живых риккетсий.
Специфическая активность диагностикума проверяется с помощью сывороток, полученных от больных сыпным тифом или от иммунизированных животных, а также от здоровых людей или больных другими болезнями.
Реакция высокоспецифична. Титр 1:40 считается диагностическим. В качестве консерванта в диагностикум добавляется 0,5 5 фенола, а в некоторые серии, предназначенные к отправке в регионы с низкой температурой, - 10 % глицерина для предупреждения порчи от замерзания.
Срок годности диагностикума - 5 лет.
Люминесцирующие сыпнотифозные антитела
Для идентификации риккетсий Провачека прямым иммунолюминесцентным методом, а также для обнаружения их применяются сыворотки иммунизированных животных, содержащие антитела против риккетсий Провачека, химически связанные с флуоресцеинизотиоцианатом.
Эта сыворотка сообщает яркое специфическое свечение риккетсиям Провачека и не реагирует с риккетсиями Бернета, Сибирикус, Квинтана и другими гетерологичными микроорганизмами.
Выпускается с красящим титром, определяемым по риккетсиям Провачека, не ниже 1:8.
Срок годности препарата - 1 год.
Волынский риккетсиозный антиген для РСК
Препарат применяется для серологической диагностики волынского риккетсиоза в реакции связывания комплемента.
Для приготовления антигена применяются штаммы риккетсий Квинтана, высокоадаптированные к плотной питательной среде КИЕМ со средой 199 и постоянно поддерживаемые на ней. На этой среде риккетсии образуют мелкие, сероватые, не сливающиеся колонии. В мазках из них обнаруживаются типичные риккетсии. У мышей они вызывают хроническую бессимптомную инфекцию, хорошо размножаются в организме платяных вшей, накапливаясь внеклеточно к 7-12 дню, не вызывают массовой гибели насекомых. Полученные культуры очищаются двукратным центрифугированием в сочетании с эфирной экстракцией и высушиваются в вакууме.
Специфическая активность антигена определяется в РСК с типовой антисывороткой, он не должен реагировать с сыворотками против риккетсий Провачека, Бернета и Сибирикус. Диагностикум консервируется мертиолятом.
Срок годности препарата - 1 год.
Ку-лихорадка
Возбудитель относится к роду Coxiella, виду C. burneti, группе 9 (Риккетсии) определителя Берджи.
Как и все риккетсии - облигатные паразиты. В пораженной клетке локализуются в фагосомах и фаголизосомах.
По морфологии, патогенезу и клинической картине мало отличаются от остальных риккетсиозов.
Ку-лихорадка передается алиментарным или воздушно-капельным путем, естественным хозяином ее возбудителя является домашний скот. Относится к природно-очаговым инфекциям.
Лечение проводится антибиотиками групп хлорамфеникола и тетрациклина.
Специфическая профилактика проводится по эпидемиологическим показаниям и заключается в вакцинации живой вакциной из риккетсий Бернета.
Живая вакцина против Ку-лихорадки для накожного применения
Препарат представляет собой взвесь яичной культуры аттенуированного штамма риккетсий Бернета (М-44), высушенную под вакуумом на снятом стерильном молоке.
Готовая вакцина должна быть стерильна, безвредна для белых мышей и морских свинок.
Титр вакцины, характеризующий ее специфическую активность, должен быть не ниже 10-9...10-10. Иммуногенность препарата определяется на 6-10 морских свинках, которым вводится 1 мл вакцины в разведении 10-5. Через 30-45 дней животным вводят 10000 МИДЭ. Все свинки должны проявить устойчивость, у 30 % из допускается развитие частичного иммунитета.
Вакцина предназначена для создания активного иммунитета против лихорадки Ку у лиц в возрасте от 14 до 60 лет, прибывающих в неблагополучные по Ку-лихорадке районы, профессионально связанных или временно привлекаемых к работе с крупным и мелким рогатым скотом, в первую очередь в тех хозяйствах, где были заболевания.
Вакцина применяется однократно, накожно, путем втирания в насечки, нанесенные на расстоянии 3-4 см одна от другой. На насечки наносится вакцина в дозе 0,05 мл на каждую, что составляет 107-108 МИДЭ.
Не ранее чем через 2 года после прививки проводится ревакцинация лиц, отрицательно реагирующих по РСК.
Срок годности вакцины - 1 год.
Люминесцирующие Ку-риккетсиозные антитела
Для идентификации Ку-риккетсий в желточных мешках куриных эмбрионов, в культурах тканей, а также для обнаружения этих микроорганизмов в фиксированных мазках крови, тканей и органов человека и животных, инфицированных членистоногих и некоторых объектах внешней среды прямым иммунолюминесцентным методом могут быть использованы люминесцирующие сыворотки, содержащие специфические антитела против риккетсий Бернета, химически связанные с флуоресцеинизотиоцианатом. Сыворотки выпускаются с красящим титром не ниже 1:8. В фиксированных мазках они сообщают риккетсиям Бернета яркое специфическое свечение и не реагируют с другими риккетсиями.
Срок годности препарата - 1 год.