Научная электронная библиотека
Монографии, изданные в издательстве Российской Академии Естествознания
Глава 3. ПРЕПАРАТЫ, ПРИМЕНЯЕМЫЕ ПРОТИВ ЗАБОЛЕВАНИЙ, ВЫЗВАННЫХ ВИРУСАМИ РОДА FLAVIVIRUS
Род Flavivirus относится к семейству Flaviviridae и включает не менее 67 вирусов из 15 антигенных групп, передающихся позвоночным хозяевам путем биологической трансмиссии членистоногими переносчиками (комарами, клещами) и относящимися на этом основании к экологической группе арбовирусов. Вирионы сферические 40-60 нм. Внутренним компонентом является нуклеокапсид, он окружен наружной липопротеидной оболочкой, в которую погружен один гликопротеид, образующий шипики на поверхности вириона. Геном несегментирован и содержит одну молекулу линейной положительно-полярной одноцепочечной РНК.
Клеточными рецепторами для вирусов являются фосфолипиды или гликолипиды. Вирусы проникают в клетки путем рецепторного эндоцитоза с последующим слиянием вирусной оболочки со стенкой вакуоли. Вирусный репликативный комплекс связан не с мембранами эндоплазматической сети, а с кариолеммой. Репродукция идет медленно. Созревание происходит путем почкования через мембраны эндоплазматической сети. Вирусные частицы в полости вакуолей часто образуют кристаллоподобные образования. Вирусы хорошо размножаются во многих культурах клеток.
Флавивирусы способны вызывать эпидемии - желтая лихорадка, лихорадка денге, эпидемические вспышки - японский энцефалит, лихорадки Сент-Луис, Росио, долины Муррея, клещевой энцефалит, Омскую геморрагическую лихорадку. Большая часть вирусов передается комарами, некоторые клещами, ряд вирусов обладает высокой экологической пластичностью, в частности способностью к трансмиссивной передаче и комарами, и клещами (вирус лихорадки Западного Нила). Многие вирусы экологически связаны с птицами и способны в связи с этим к трансконтинентальной интродукции. Флавивирусы распространены на всех континентах, главным образом - в странах с экваториальным и тропическим климатом (передаваемые комарами), меньше - в условиях умеренного климатического пояса (передаваемые клещами). В связи с широтой распространения и тяжестью клинического течения флавивирусы имеют большое медицинское, а многие и ветеринарное значение.
Желтая лихорадка
Острое инфекционное заболевание, имеющее две эпидемиологические формы - городскую и джунглевую (лесную). Желтая лихорадка лесная встречается в некоторых районах тропической Африки и Южной Америки как природно-очаговое заболевание, поражающее приматов и передающееся комарами рода Haemagogus и Aedes. Обычно главную опасность представляет не эта, сравнительно редкая болезнь, а желтая лихорадка городская, когда болезнь передается от человека человеку через укус комара Aedes aegypti, который распространился во всем тропическом поясе.
Болезнь характеризуется синдромом резкой интоксикации, двухволновым типом температурной кривой, выраженным геморрагическим синдромом, поражением печени и почек, прострацией и желтухой.
Клиническая картина желтой лихорадки чрезвычайно разнообразна: от бессимптомной формы до злокачественной, со смертельным исходом на 3-10 сутки болезни. При тяжелых формах заболевание начинается остро, с быстрым подъемом температуры до 39,5-40 °С. Появляются сильная головная боль, боли в мышцах спины и конечностей, тошнота, рвота. С первых дней болезни выражены одутловатость и гиперемия лица больного. Высокая температура держится 2-3 дня, затем снижается. В это время появляется желтуха, мелкоточечная геморрагическая сыпь. Иногда отмечаются другие геморрагические явления: кровотечения из носа, матки, мочевого пузыря, кишечника. При этом поражаются печень, почки, центральная нервная система.
При доброкачественном течении на 8-9 день болезни симптомы постепенно идут на убыль. Однако наблюдаются и тяжелые, даже молниеносные формы болезни, которые сопровождаются кровавой рвотой с первого дня болезни; больные погибают до возникновения желтухи от острой сердечной недостаточности, желудочно-кишечных кровотечений, миокардита, шока.
В недавнем прошлом желтая лихорадка городская вызывала тяжелые эпидемии с высокой смертностью. В настоящее время ее распространение уменьшено в значительной мере благодаря мерам по уничтожению комаров инсектицидами, индивидуальной защите от комаров и предотвращению переноса комара Aedes aegypti морским и воздушным транспортом.
Вакцину обязательно применяют для активной иммунизации для индивидуальной защиты людей, выезжающих в эндемичные районы, для создания коллективного иммунитета в этих районах и иммунизации отдельных групп людей в потенциально опасных местностях, чтобы предотвратить географическое распространение болезни.
Вакцина против желтой лихорадки (ВЖЛ)
Основой препарата является живой аттенуированный вирус желтой лихорадки, содержащийся в надосадочной жидкости, получаемой при центрифугировании гомогената тонко измельченной ткани зараженных вирусом куриных эмбрионов.
Для изготовления вакцины используют штамм вируса желтой лихорадки «17Д». Специфическим биологическим сырьем для вакцины против желтой лихорадки являются эмбрионы кур, свободные от специфической патогенной микрофлоры,- SPF-эмбрионы (SPF-specific pathogen free). Исследования сыворотки крови кур, цыплят и петухов SPF-стада проводятся каждые шесть месяцев на отсутствие 17 возбудителей инфекционных заболеваний. Аттенуированный вирус желтой лихорадки термолабилен, поэтому полученный жидкий препарат необходимо содержать при температуре -50 °С и в максимально короткие сроки подвергать высушиванию (из замороженного состояния в условиях высокого вакуума). Содержание влаги в сухом препарате не должно превышать 0,5 %. Одна прививочная доза (0,5 мл) препарата содержит: вирус желтой лихорадки не менее 1000 ЛД50 или 1600 БОЕ, лактозу - 4 %, сорбитол - 2 %, L-гисти-
дин - 0,01 М, L-аланин - 0,01 М. Вакцина не содержит консервантов и антибиотиков. Препарат соответствует требованиям ВОЗ.
Сухой препарат по внешнему виду представляет собой пористую таблетку бело-желтого цвета, после растворения которой получается мутноватая жидкость розоватого цвета, без осадка и хлопьев. Вакцина должна быть специфичной, стерильной, безвредной и безопасной для вакцинируемого.
Препарат выпускают в ампулах или флаконах, содержащих 5, 10 или 20 доз. Непосредственно перед применением вакцину разводят холодным стерильным физиологическим раствором с соблюдением обычных правил асептики. После добавления физиологического раствора ампулу или флакон необходимо слегка потрясти, чтобы ускорить растворение, которое должно наступить в течение 3-4 минут. Физиологический раствор добавляют в следующих количествах: в ампулу или флакон с 5 дозами - 3 мл, с 10 дозами - 5,5 мл, с 20 дозами - 10,5 мл. Вакцину вводят в объеме 0,5 мл (одна прививочная доза) независимо от возраста прививаемого. Разведенным препаратом можно пользоваться для прививок не более 1 часа при условии содержания на холоде. Неиспользованная в течение указанного срока вакцина уничтожается.
Препарат вводят подкожно в область верхней трети плеча. Вакцина обеспечивает защиту против желтой лихорадки через 10 дней после прививки. Сохраняется иммунитет на протяжении 10 лет, после чего в случае необходимости проводят ревакцинацию, обеспечивающую невосприимчивость к инфекции еще на 10 лет. Вакцина должна вызывать образование типоспецифических вируснейтрализующих антител не менее чем у 95 % привитых.
Живая вакцина против желтой лихорадки очень неустойчива к повышенной температуре, поэтому непродолжительное хранение ее (не более 3 месяцев) допускается при температуре не выше 4 °С. При длительном хранении препарата рекомендуется температурный режим от -5 до -20 °С. Хранить вакцину следует в темном помещении, защищая от прямого солнечного света.
Производство лиофилизированной вакцины против желтой лихорадки осуществляет ФГУП «Предприятие по производству бактерийных и вирусных препаратов Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им.М.П. Чумакова РАМН». Вакцина выпускается также в США, Франции, Германии, Великобритании, Австралии, Сенегале, Нигерии, Индии, Лаосе, Бразилии, Колумбии. ВОЗ для экстренных случаев имеет запас 2,3 млн. доз вакцины.
Срок годности вакцины 1 год с момента ее изготовления. После истечения его производят переконтроль путем повторного титрования вакцины. В случае сохранения допустимой инструкцией активности препарата срок годности может быть продлен еще на 6 месяцев.
Лихорадка денге
Лихорадка денге является антропозоононым природноочаговым заболеванием, возбудитель которого передается комарами. Существует две эпидемиологические формы лихорадки денге: лихорадка денге джунглей и лихорадка денге городов. Первая существует в природе независимо от человека. Лихорадка денге городов вызывается 4 различающимися антигенными типами вируса - вирусом денге 1 (штамм Hawaii), денге 2 (штамм New Gwinea), денге 3 и 4, - относящимися к роду Flavivirus.
Лихорадка распространена в тропическом и субтропическом поясе во многих странах Старого и Нового Света. Главную опасность представляет геморрагическая лихорадка, передающаяся от человека к человеку комарами Aedes aegypti и Aedes albopictus. Болезнь протекает с высокой температурой, болевым синдромом, сыпями, тяжелой интоксикацией.
В последние годы встречается во многих странах Юго-Восточной Азии и дает высокую смертность.
Вирус проникает в организм через кожу при укусе зараженным комаром. Инкубационный период длится от 3 до 15 дней. На месте укуса через 3-5 дней возникает ограниченное воспаление, где вирус накапливается и размножается. В последние 12 часов инкубационного периода вирус проникает в кровь. Вирусемия продолжается до 3-5 дня лихорадочного периода. Заболевание может протекать в классической и геморрагической формах. Заболевание обычно начинается внезапно. Обычно среди полного здоровья появляются озноб, боли в спине, крестце, позвоночнике, суставах. У всех больных отмечается лихорадка, температура тела поднимается до 40 °С. Отмечаются резкая адинамия, анорексия, тошнота, головокружение, бессонница, у большинства больных - гиперемия и пастозность лица, инъекция сосудов склер, гиперемия зева.
Профилактика болезни основывается на борьбе с комарами и защите от их нападения, применении вакцинации.
В настоящее время ведутся активные работы по конструированию убитой и живой тетравакцины ко всем четырем серотипам вируса, но они далеки от завершения.
Японский энцефалит
Заболевание вызывается вирусом рода Flavivirus. Штаммы вируса, выделенные в различных географических районах, неоднородны в антигеном отношении.
Японский энцефалит - тяжелое трансмиссивное природноочаговое заболевание, сопровождающееся поражением нервной системы и дающее высокую летальность. Заболевание распространено в Восточной и Юго-Восточной Азии. Резервуаром вируса являются птицы, переносчиками - комары Culex tritaeniorhynohus и др. В эпизоотический процесс часто вовлекаются свиньи, резко усиливая циркуляцию вируса, и тогда возникают крупные вспышки среди людей.
Возбудитель проникает в организм человека при укусе комара и распространяется с кровью по всему организму, размножаясь в силу нейротропности в центральной нервной системе.
Клиническая картина болезни варьирует от общелихорадочного синдрома до характерного энцефалита. Инкубационный период колеблется от 4 до 14 дней. В начальном периоде заболевания наблюдаются повышение температуры, головная боль, тошнота, рвота, симптомы поражения центральной нервной системы (общая разбитость и быстрое помрачение сознания, менингеальные симптомы, двигательное беспокойство, сонливость, иногда расстройство глотания и речи).
В период эпидемии диагностика японского энцефалита основывается на эпидемиологическом анализе, клинических особенностях болезни, результатах вирусологических исследований. Иммунологические методы диагностики основаны на обнаружении специфических антител в крови. Кроме реакции связывания комплемента, для иммунологической диагностики используют также реакции подавления гемагглютинации и нейтрализации.
Большое значение в профилактике имеет борьба с комарами-переносчиками и защита людей от их нападения. В основе специфической профилактики японского энцефалита лежит систематическая вакцинация населения.
Современные лицензированные вакцины против японского энцефалита представлены инактивированными вакцинами, полученными как с использованием клеток мозга мыши, так и клеток Веро, а также живой аттенуированной вакциной SA 14-14-2, полученной в первичной культуре клеток почек хомяков. В настоящее время не существует вакцины против японского энцефалита, которая бы прошла преквалификацию ВОЗ. Единственной зарегистрированной на международном уровне вакциной является инактивированная вакцина на базе вирусных штаммов Накаяма, выращенных в клетках мозга мыши, тогда как некоторые другие вакцины производятся отдельными странами и используются внутри этих стран. Несколько стран уже внедрили вакцинацию против японского энцефалита в свои календари плановой иммунизации детей. По мере появления на рынке улучшенных вакцин прогнозируемый на 2012 г. глобальный спрос на вакцины против японского энцефалита должен в два раза превысить нынешний уровень. В настоящий момент в стадии разработки находится несколько новых вакцин.
В качестве экстренной профилактики и средства лечения рекомендуется специфический гамма-глобулин.
Гамма-глобулин против японского энцефалита
Препарат представляет собой γ-глобулиновую фракцию, выделяемую спиртовым осаждением на холоде из сыворотки лошадей или ослов, гипериммунизированных вирусом японского энцефалита. В качестве антигена используется суспензия мозга мышей или куриных эмбрионов, инфицированных вирусом. К препарату представляются те же требования, что и ко всем гамма-глобулинам. Помимо обычных контролей, он проверяется на специфическую безвредность. Для этого пяти белым мышам весом 8-10 г вводится в мозг 0,03 γ-глобулина. За животными наблюдают в течение пятнадцати дней. Препарат считается безвредным, если все мыши остаются живыми и здоровыми. В тех случаях, если от животных выделяют вирус, который с помощью реакции нейтрализации идентифицируется как возбудитель японского энцефалита, препарат бракуют.
Вируснейтрализующая активность гамма-глобулина определяется реакцией нейтрализации вируса японского энцефалита. Годным к выпуску считают препарат с индексом нейтрализации не ниже 10000.
Срок годности препарата - 8 лет.
Тканевый диагностикум для РСК японского энцефалита
Действующим началом препарата является инактивированная бетапропиолактоном культуральная жидкость тканевой культуры почечного эпителия овечьего эмбриона, инфицированной вирусом японского энцефалита. Для приготовления диагностикума используется штамм П-I вируса японского энцефалита не ранее 5-6 культурального пассажа. Специфичность антигенной структуры определяется реакцией нейтрализации на белых мышах с иммунной и нормальной сыворотками. В разведении 1:16 дает четко выраженную специфическую реакцию связывания комплемента. Помимо обычных контролей, проверяется специфическая безвредность препарата. Для этого после пассажей его на культуре фибробластов производится заражение мышей культуральной жидкостью. Животные должны быть здоровы. Препарат выпускается в сухом виде. Предназначен для серологической диагностики японского энцефалита, для обнаружения антител у лиц из очагов инфекции и в качестве эталона при идентификации выделенных штаммов.
Лихорадка Сент-Луис
Возбудитель - вирус рода Flavivirus, впервые был выделен из мозга человека во время обширной эпидемической вспышки в г. Сент-Луис в 1933 г.
Энцефалит Сент-Луис - природно-очаговое заболевание. Природные очаги поддерживаются дикими птицами и комарами Culex tarsalis, C. pipiens, C. quinquefasciatus - на среднем западе и на юге, C. nigripalpus - во Флориде и Карибском бассейне. Антитела к вирусу были выделены также от летучих мышей.
Переносчиками вируса являются комары родов Culex и Aedes: C. tarsalis, C. pipiens, C. nigripalpus, Aedes dorsalis, Ae. taeniorhynchus, Ae. sollicitans и др.
Появление заболеваний среди людей совпадает с сезонной активностью перечисленных видов комаров.
Вирус проникает в организм человека через кожу при укусе зараженного комара и распространяется гематогенным путем, поражая внутренние органы.
Инкубационный период продолжается 4-21 день. Начало болезни внезапное, с лихорадкой, тошнотой, рвотой, головной болью и менингиальным синдромом. Температура тела повышается до 40-41 °С и держится в течение 7-10 дней. Затем появляется атаксия, нарушение речи, мочеиспускания, спутанность сознания, тремор. Параличи развиваются редко. Клинически явный энцефалит наблюдается у 75 % больных, у остальных - менингит. Возможно молниеносное течение с летальным исходом через 2-4 дня. Летальность колеблется от 10 до 20 %. В ряде случаев встречаются стертые и бессимптомные формы, выявляемые только серологическими методами. В 5 % случаев развиваются остаточные изменения ЦНС. Известны случаи лабораторного заражения.
Лабораторная диагностика осуществляется с помощью исследования крови и ликвора в РТГА, РСК, РН и ИФА (Ig M).
Профилактика заключается в систематическом проведении санитарно-эпидемиологической разведки, наблюдений, мероприятий по уничтожению комаров и применении репеллентов.
Для специфической вакцинопрофилактики целесообразно использовать формолвакцину из мозга зараженных мышей, но она создает у привитых людей кратковременный нестойкий иммунитет.
Энцефалит Росио
Вирус был выделен в 1975 году во время обширной вспышки энцефалита на Атлантическом побережье штата Сан-Пауло в Бразилии. Переносчиками предположительно служат комары Psorophora ferox и Aedes scapularis.
Инкубационный период составляет 7-14 суток. Заболевание начинается внезапной лихорадкой, головной болью, ригидностью шейных мышц, рвотой и явлениями поражения центральной нервной системы. Летальность у взрослых составляет 10 %, у детей и пожилых - 30 %.
Профилактика включает мероприятия по уничтожению комаров, применение репеллентов. Ведутся работы по конструированию вакцины.
Энцефалит долины Муррей (австралийский энцефалит)
В 1951 г. в долине рек Муррей и Дарлинг во время очередной эпидемии энцефалита был выделен вирус, названный вирусом долины реки Муррей. Вирус патогенен для мышей и обезьян при внутримозговом введении. Клиническая картина у зараженных животных сопровождается конвульсиями и параличами задних конечностей. Некоторые домашние животные, дикие и домашние птицы чувствительны к вирусу.
Вирус размножается на куриных эмбрионах и в культурах тканей с цитопатическим эффектом. По антигенным свойствам близок к вирусу японского энцефалита.
Характерной эпидемиологической особенностью австралийского энцефалита является его сезонность. Австралийский энцефалит наблюдается, начиная с января по апрель, максимум приходится на февраль и март. Эти месяцы соответствуют летним месяцам Восточного полушария. Все заболевания встречались в Новом Южном Уэльсе, в населенных пунктах, отстоящих друг от друга на значительном расстоянии, преимущественно в скотоводческих районах.
Инкубационный период - 5-12 дней. Острой фазе болезни иногда предшествуют: головная боль, усталость, повышенная чувствительность, слабость конечностей. Часто продромальные явления отсутствуют. Температура повышается до 38,5-40 °С. Быстро развиваются инфекционно-токсические, общемозговые и менингеальные симптомы. В качестве ранних симптомов наблюдаются: сонливость, мышечная слабость, расстройство координации движений, спутанность сознания, бред, тонический спазм, тремор конечностей, судороги. При прогрессирующем течении развивается коматозное состояние.
Австралийский энцефалит длится около 2 недель. В случаях с неблагоприятным исходом смерть наступает на 2-5 день.
В качестве средств специфической профилактики возможно использование формолвакцины.
Клещевой энцефалит (весенне-летний энцефалит)
Заболевание вызывается вирусом группы В-арбовирусов, относящимся к мелким РНК-вирусам рода Flavivirus. Вирус клещевого энцефалита включает три подтипа: европейский, дальневосточный и сибирский.
Клещевой энцефалит - природно-очаговая вирусная инфекция ЦНС, переносимая иксодовыми клещами. В качестве основных переносчиков вируса выступают клещи Ixodes persulcatus, Ix. ricinus, Ix. pavlovsky, Ix. trianguliceps, Haemaphysalis concinna, H. japonica, Dermacentor marginatus, D. silvarum, D. nuttali, D. reticulatus и др. Вирус длительно сохраняется в организме иксодовых клещей с трансфазовой передачей вируса, в организме гамазовых клещей возбудитель удерживается не менее месяца.
Вирус проникает в организм человека при укусе зараженного клеща через кожу. После присасывания клеща вирус распространяется гематогенно и быстро проникаетв клетки мозга, фиксируясь здесь и вызывая дегенеративные изменения. Параллельно с накоплением вируса развиваются воспалительные изменения сосудов и оболочек мозга. Возникновение полиомиелитных и радикулоневритических синдромов связано с лимфогенным путем распространения вируса. Характер течения болезни зависит от способа внедрения, свойств и дозы возбудителя, а также резистентности и реактивности макроорганизма.
Вирусемия при клещевом энцефалите имеет двухволновый характер: кратковременная первичная вирусемия, а затем повторная (в конце инкубационного периода), совпадающая с размножением вируса во внутренних органах и появлением его в центральной нервной системе. Возможно длительное вирусоносительство, различное по своим проявлениям и последствиям : латентная инфекция (вирус интегрирован с клеткой или существует в дефектной форме), персистентная инфекция (вирус репродуцируется, но не вызывает клинических проявлений), хроническая инфекция (вирус репродуцируется и вызывает клинические проявления с рецидивирующим, прогрессирующим или регрессирующим течением), медленная инфекция (вирус репродуцируется после длительного инкубационного периода, вызывает клинические проявления с неуклонным прогрессированием, приводящим к смерти).
Инкубационный период длится 4-14 дней. Заболевание начинается внезапно, с повышением температуры до высоких значений, появлением менингеальных симптомов, поражением ЦНС. Затем появляются нарушения чувствительности, координированных движений. Форма течения болезни может быть различной - от бессимптомной и стертой до тяжелой, осложненной параличами и парезами, иногда может приводить к смерти.
Восприимчивость людей к клещевому энцефалиту всеобщая. Наибольший риск заболеваемости у лиц, непосредственно работающих или проживающих в лесной зоне. Большинство заражений вирусом приводит к инаппарантному течению инфекции с развитием иммунитета.
Клещевой энцефалит после выздоровления человека оставляет длительный и прочный иммунитет.
Лабораторным подтверждением диагноза клещевого энцефалита служит серологическое обследование больных с целью выявления наличия и нарастания титра антител. С этой целью применяются реакции связывания комплемента (РСК), торможения гемагглютинации (РТГА), подавления гемагглютинации (РПГА), непрямой гемагглютинации (РНГА), нейтрализации (РН), диффузной преципитации в агаре (РДПА), на биопробных мышах или в клеточных культурах. Диагностическим является нарастание титра антител
в 4 раза.
Основным мероприятием в профилактике клещевого энцефалита является борьба с иксодовыми клещами. Специфическая профилактика осуществляется путем прививок жидкой адсорбированной вакциной и лиофилизированной формой культуральной жидкости.
На территории РФ используются коммерческие вакцины отечественного и зарубежного производства. Вакцины взаимозаменяемы. Западноевропейские штаммы вируса клещевого энцефалита, из которых готовятся импортные вакцины, и восточноевропейские штаммы, используемые в отечественном производстве, близки по антигенной структуре. Сходство в структуре ключевых антигенов составляет 85 %. В связи с этим, иммунизация вакциной, приготовленной из одного вирусного штамма, создает стойкий иммунитет против заражения любым вирусом клещевого энцефалита. Эффективность зарубежных вакцин в России подтверждена, в том числе исследованиями с использованием российских диагностических тест-систем.
Вакцина против клещевого энцефалита культуральная очищенная концентрированная инактивированная сухая, лиофилизат
для приготовления суспензии для внутримышечного введения
Применяется для специфической профилактики клещевого энцефалита для детей с 3-х лет и взрослых, а также для иммунизации доноров с целью получения специфического иммуноглобулина.
Вакцина клещевого энцефалита представляет собой лиофилизированную очищенную концентрированную суспензию инактивированного формалином вируса клещевого энцефалита. Вирусную суспензию получают путем репродукции вируса в первично-трипсинизированной культуре клеток куриного эмбриона. Действующим началом вакцины является специфический антиген вируса клещевого энцефалита (штамм «Софьин» или «205»). Вакцина - пористая масса белого цвета, гигроскопична. Одна прививочная доза (0,5 мл) препарата содержит: специфический антиген вируса клещевого энцефалита - активный компонент; альбумин человека донорский - 250 + 50 мкг (стабилизатор); сахарозу - 37,5 + 0,5 мг (стабилизатор); желатин - 5 + 0,5 мг (формообразователь); бычий сывороточный альбумин - не более 0,5 мкг; протамин-сульфат - не более 5 мкг. Вакцина не содержит формальдегида, антибиотиков и консервантов.
Растворитель - гель алюминия гидроксида, гомогенная суспензия белого цвета без посторонних частиц (включений), при отстаивании разделяющаяся на два слоя: бесцветную прозрачную надосадочную жидкость и рыхлый осадок белого цвета, не дающий при встряхивании неразбивающихся хлопьев и конгломератов.
Вакцина стимулирует выработку клеточного и гуморального иммунитета к вирусу клещевого энцефалита. После двух инъекций препарата (курс вакцинации) вируснейтрализующие антитела обнаруживаются не менее чем у 90 % привитых.
Курс вакцинации состоит из двух внутримышечных инъекций по 1 дозе (0,5 мл) с интервалом 1-7 месяцев. Курс вакцинации (две прививки) можно проводить в течение всего года, в том числе и в летний период (эпидсезон), но не позднее, чем за 2 недели до посещения очага клещевого энцефалита.
Вакцинация доноров для получения иммуноглобулина проводится по схеме - две инъекции по 0,5 мл с интервалом 5-7 месяцев или три инъекции в дозах 0,5 мл для первой и по 1,0 мл для второй и третьей с интервалом 3-5 недель между прививками. Первая схема обеспечивает лучший иммунизационный эффект. Ревакцинация - дозой 0,5 мл через 6-12 месяцев. Первый забор крови у доноров проводят через 14-30 дней после курса вакцинации.
Хранят строго при температуре от 2 до 8 °С.
Срок годности препарата - 3 года.
Культуральная инактивированная вакцина против клещевого энцефалита
Препарат изготовлен из обезвреженного формалином (0,05 %) вируса клещевого энцефалита, выращенного на взвешенной культуре фибробластов эмбриона курицы, в поддерживающей среде 199. Вакцина выпускается в жидкой форме с адсорбентом (гидроокись алюминия в концентрации 1 мг в 1 мл) и в сухой лиофилизированной форме без адсорбента с вяжущим наполнителем и стабилизатором 1,5 % желатинозы и 8,5 % сахарозы.
Жидкая вакцина слегка опалесцирует, имеет розовато-фиолетовый или розово-оранжевый цвет, что связано с присутствием в вакцине тонкой взвеси адсорбента и индикатора фенолрот. Адсорбент может давать белый аморфный осадок, который при встряхивании довольно быстро разбивается в тонкую взвесь.
Сухая вакцина представляет собой розовато-белую, пористую таблетку (в ампуле или флаконе). После растворения массы стерильной дистиллированной водой жидкость опалесцирует, имеет розоватый цвет.
Для ее изготовления применяются штаммы вируса клещевого энцефалита «Софьин» и «Пан». Штаммы должны обладать достаточной вирулентностью, что проверяется на молодых белых мышах весом 7-8 г.
В качестве исходного материала применяется культуральная вируссодержащая жидкость, обезвреженная формалином в течение 72 часов при 37 °С и пропущенная через сепаратор и осветляющие асбестовые фильтры.
В препарате содержатся антибиотики, добавленные с питательной средой в культуру ткани (пенициллин, микостатин, стрептомицин).
Вакцина стерильна, проверена на безвредность на морских свинках при инокуляции 2 разовых доз, антигена в опытах на кроликах и иммуногенна в наблюдениях на чистолинейных мышах.
Жидкая вакцина выпускается во флаконах емкостью 5 и 15 мл, сухой препарат в 10-граммовых стеклянных ампулах (под вакуумом) или в 10 граммовых флаконах, заполненных нейтральным газом.
Схема вакцинации клещевого энцефалита состоит из 3 доз, которые вводятся по схеме 0-1(3)-9(12) месяцев; ревакцинация проводится каждые 3 года. После стандартного первичного курса из 3-х прививок иммунитет сохраняется в течение, как минимум, 3 лет (максимум - 5). По профессиональной технике безопасности, для выезжающих на полевые работы в эндемичные регионы, ревакцинация проводится ежегодно. В случае, когда была пропущена одна ревакцинация (1 раз в 3 года), весь курс заново не проводится, делается лишь одна прививка-ревакцинация. Если было пропущено 2 плановых ревакцинации, курс прививок против клещевого энцефалита проводится заново. Вакцину вводят подкожно в область наружного угла лопатки.
Вакцина должна храниться при температуре 10 °С.
Культуральная жидкая вакцина с адсорбентом годна 2 года, по истечении этого срока она подлежит вторичной проверке на иммуногенность. Сухой препарат годен в течение 3 лет.
Гамма-глобулин против клещевого энцефалита
Препарат изготавливается из сыворотки лошадей, гипериммунизированных живым вирусом клещевого энцефалита. Применяющийся для этой цели антиген представляет 10 % суспензию мозга белых мышей, зараженных интрацеребрально четырьмя различными штаммами вируса клещевого энцефалита. Может применяться и антиген из вируса, выращенного во взвешенных клетках фибробластов эмбриона курицы.
Мозговой вирусный антиген вводится лошадям в первые два цикла иммунизации подкожно в виде пяти и трех инъекций с интервалами 6-7 дней, в последующие циклы производится 2-3 подкожных или внутримышечных инъекции с интервалами в 4-5 дней. Промежутки между циклами составляют 14 дней.
Культуральный вирусный антиген применяется в первый цикл иммунизации в виде 10 инъекций различных доз антигена, вводимых подкожно и внутривенно с интервалами в сутки 6-7 дней. В последующие два цикла антиген вводится также в виде 8 инъекций с теми же интервалами. В дальнейшем за каждый цикл лошадь получает 3 подкожных и внутривенных инъекции антигена с промежутками 5-7 дней. Продуцентами лошади становятся, когда их сыворотка будет нейтрализовать штамм «Абсетарров», не использовавшийся в качестве антигена. Лошадей кровопускают на 7-8 день со дня последнего введения антигена, дважды с интервалом в один день. После кровопускания лошадь отдыхает 14 дней.
Из полученной иммунной сыворотки извлекают γ-глобулин методом спиртового осаждения. Препарат представляет собой прозрачный слегка опалесцирующий 10 % раствор гамма-глобулина, содержащий специфические антитела. Он должен быть стерильным, безвредным в опыте на морских свинках, апирогенным на кроликах, содержать остаточного спирта не более 4,5 % и не иметь альбуминов.
Разливают в ампулы по 3 мл и по 5 штук упаковывают в коробку с инструкцией по применению.
Препарат применяют как для лечения клещевого энцефалита и родственных инфекций, так и с профилактической целью. Препарат вводят внутримышечно в верхний наружный квадрант ягодицы.
С лечебной целью вводят по 3-6 мл 2-3 дня подряд. Применяют в остром периоде болезни. Он может предупредить дальнейшее развитие заболевания, но параличи не излечивает.
С профилактической целью вводят в следующих количествах: детям до 12 лет - 1,5. От 12 до 16 лет 2 и старше 16 лет и взрослым - 3 мл.
Препарат годен в течение 3 лет с момента определения его специфической активности.
Противоэнцефалитная гипериммунная сыворотка, очищенная и концентрированная
Специфическую сыворотку получают также как противоэнцефалитный гамма-глобулин. В дальнейшем она очищается от балластных веществ и концентрируется. Сыворотка имеет вид прозрачной или слегка опалесцирующей жидкости желтоватого или бледно-золотистого цвета. Препарат должен быть стерильным, безвредным, апирогенным и иметь специфическую активность не ниже 2500.
Препарат разливается в ампулы по 5 мл. Применяется внутримышечно в тех же случаях, что и гамма-глобулин, после проверки чувствительности к лошадиному белку.
С лечебной целью применение рекомендуется начать как можно раньше; больным с подозрением на клещевой энцефалит в легких случаях вводится по 6-7 мл 2-3 дня подряд, а в тяжелых случаях по 8-9 мл 4-6 дней подряд.
С профилактической целью препарат вводится в дозе 5-7 мл невакцинированным лицам в тех случаях, когда имело место присасывание клещей в очаге заболевания или при лабораторном заражении.
Срок годности препарата - 2 года.
Жидкий или сухой диагностикум клещевого энцефалита для реакции связывания комплемента
В качестве антигена при постановке реакции связывания комплемента с целями обнаружения специфических антител к вирусу клещевого энцефалита в сыворотках больных и реконвалесцентов, а также и у животных в природных очагах используется инактивированный диагностикум, изготавливаемый из вируса штамма «Софьин», размноженного в мозгу белых мышей. При изготовлении мозгового антигена 5 % суспензия вирусной ткани помещается на 18-20 часов в холодильник при 4 °С. Суспензию в первые 2-3 часа встряхивают 2-3 раза, затем центрифугируют и надосадочную жидкость очищают протаминсульфатом.
Антиген представляет собой прозрачную бесцветную или слегка желтоватую жидкость, для инактивации вируса в нем применяют 0,05 % формалина. Сухой препарат представляет собой пористую таблетку желтовато-белого цвета, хорошо растворяющуюся в течение 5 минут.
В РСК он должен работать при разведении его 1:2-1:4 с типоспецифической сывороткой, титр которой указывается на этикетке ампулы, прилагаемой к диагностикуму.
Диагностикум разливается по 3 мл в ампулы емкостью 5-6 мл. В каждой коробке содержится по 6 ампул диагностикума, по 2 ампулы специфической и нормальной сыворотки. Сухого препарата имеется в каждой ампуле по 0,5 мл.
Срок годности жидкого диагностикума - 6 месяцев, сухого - 1 год.
Тканевый диагностикум для реакции связывания комплемента клещевого энцефалита
Действующим началом препарата является инактивированная бетапропиолактоном поддерживающая среда тканевой культуры почечного эпителия эмбриона овцы или куриных фибробластов, инфицированных вирусом клещевого энцефалита. Для приготовления диагностикума используются штаммы вируса не ранее 5-6 культурального пассажа. Безвредность препарата определяется заражением мышей поддерживающей средой культуры фибробластов куриного эмбриона, на которой пассировался диагностикум.
В разведении 1:16 он дает четко выраженную реакцию связывания комплемента со специфической иммунной сывороткой. Препарат выпускается в сухом виде. Предназначен для обнаружения антител у лиц в очагах инфекции и в качестве эталона при идентификации штаммов в реакции связывания комплемента.
Срок годности - 3 года.
Антиген вируса клещевого энцефалита для реакции торможения гемагглютинации и реакции связывания комплемента
Данный антиген применяется для РТГА и РСК с целями выявления специфических антител у больных клещевым энцефалитом и реконвалесцентов, а также у животных.
Изготавливается из мозга белых мышей, зараженных вирусом клещевого энцефалита (штамм «Софьин»). Антиген из вируссодержащей мозговой суспензии экстрагируется боратным буфером рН 9,0, с последующей очисткой протаминсульфатом и обезвреживанием бетапропиолактоном.
Препарат стерилен и специфически безопасен, вызывает гемагглютинацию 0,5 % суспензии эритроцитов гуся в разведении 1:160 и обладает комплемент-фиксирующей активностью не ниже 1:8. Типоспецифичен, не реагирует с вирусами против японского энцефалита и др. лихорадок.
Антиген выпускается в жидком и сухом виде. В коробке с препаратом имеется по одной ампуле лиофилизированной типоспецифической и нормальной сыворотки для РТГА и по 2 ампулы лиофилизированной типоспецифической и нормальной сыворотки для РСК. Антиген применяется в РТГА в рабочей дозе, равной 8 гемагглютинирующим единицам, а рабочее разведение для РСК содержит 2 или 4 антигенных единицы.
Омская геморрагическая лихорадка
Заболевание вызывается вирусом, родственным вирусу клещевого энцефалита в антигенном отношении. Резервуар вируса - мелкие степные зверьки, переносчики - клещи Dermacentor pictus, D. Marginatus. Человек заражается случайно, находясь в природных очагах инфекции.
Входными воротами инфекции является кожа в месте укуса клеща или мелкие повреждения, инфицированные при контакте с ондатрой или водяной полевкой. Вирус проникает в кровь и разносится по всему организму, поражая преимущественно сосуды, нервную систему и надпочечники.
Болезнь характеризуется коротким инкубационным периодом: 2-4 суток. Клиническое течение - лихорадка, геморрагические сыпи, атипическая ожоговая пневмония. Болезнь обычно протекает доброкачественно.
Восприимчивость к вирусу омской геморрагической лихорадки всеобщая и высокая. Чаще болеют люди, находившиеся в поле или лесу. Заболевания носят спорадический или групповой характер. У переболевших развивается стойкий иммунитет.
Для подтверждения диагноза используют РСК, РН, РПГА. В первые дни болезни вирус может быть выделен из крови. Для серологических исследований используют парные сыворотки больного, взятые с интервалом 10-15 суток.
Профилактические и противоэпидемические мероприятия заключаются в проведении дератизации, уничтожении клещей. Для специфической вакцинации и лечения применяются те же препараты, что и для клещевого энцефалита (культуральная инактивированная вакцина против клещевого энцефалита, гамма-глобулин против клещевого энцефалита, противоэнцефалитная гипериммунная очищенная и концентрированная сыворотка).