Научная электронная библиотека

Монографии, изданные в издательстве Российской Академии Естествознания

ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ПРИ ОНКОГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ

Соколова Т А, Котловский Ю В, Дубынина Е В, Ивановская О В, Веселова В К, Кузнецова Е Ю,

Глава 4. Цитогенетический анализ онкогематологических заболеваний

Анализ процесса малигнизации клеток и дальнейшей опухолевой прогрессии показал, что они тесно связаны с реорганизацией генома, которая нередко выражается структурными или численными изменениями хромосом и их отдельных районов. В настоящее время известны многочисленные примеры хромосомных перестроек, которые либо обуславливают предрасположенность к развитию онкологических заболеваний, либо могут являться прямой причиной злокачественной трансформации [9]. Опухолевая прогрессия также часто связана с появлением клеточных клонов, несущих новые хромосомные перестройки [11] и отличающихся от исходного штамма целым рядом признаков, имеющих непосредственное значение для прогнозирования развития заболевания и выбора оптимальной стратегии лечения. Хромосомные аберрации играют значительную роль в процессе возникновения и эволюции неоплазий [8, 7, 14]. Впервые прямая связь между конкретной хромосомной перестройкой и определенным типом злокачественно заболевания была установлена в 1960 году Новеллом и Хунгерфордом [10]. Обнаружение филадельфийской хромосомы (Ph), как типичной хромосомной аномалии при хронической миелоидной лейкемии стимулировало интенсивные цитогенетические исследования. Однако, вместо выявления небольшого числа хромосомных перестроек, непосредственно связанных с развитием определенных типов неоплазий, было обнаружено огромное разнообразие аберрантных кариотипов, в том числе и при сравнении казалось бы идентичных неоплазий.

При проведении достаточного объема исследований присутствие типичных хромосомных перестроек было показано для большого числа неоплазий человека [9]. Были выявлены новые гены, изменение экспрессии которых в ряде случаев приводит к малигнизации клеток [12]. В это же время стала очевидной клиническая значимость данных хромосомного анализа. Выявление типичных хромосомных перестроек при некоторых заболеваниях оказывается принципиальным при постановке окончательного диагноза, выбора стратегии лечения и контроля эффективности проводимой терапии [13].

Хромосомный анализ имеет большое значение для диагностики случаев, когда трансформация произошла в лимфоцитах очень низкого уровня дифференцировки – еще до перестройки генов иммуноглобулинов или tcr генов. При таких заболеваниях другие методы диагностики оказываются мало эффективными. Отметим случаи, когда выявление клональности цитогенетическими методами имеет большое значение для постановки окончательного диагноза:

• Диагностика гипопластической острой миелоидной лейкемии при возможной апластической анемии.

• Дифференцирование миелоидного диспластического синдрома и иных нарушений функций костного мозга.

• Дифференцирование гиперэозинофильного синдрома, обусловленного миелоидной неоплазией и реактивной эозинофилии.

• Подтверждение диагноза полицитемии rubra vera.

• Подтверждение анализа хронической гранулоцитной лейкемии на ранних стадиях.

• Подтверждение диагноза лимфомы в случаях ангиоиммунобластных лимфоаденопатия-подобных лимфом.

• Отличие лимфом, особенно иммунобластных лимфом, от неконтролируемой пролиферации, обусловленной инфекцией EBV иммунодефицитных пациентов.

• Подтверждение диагноза гранулоцитной лейкемии, особенно в случаях без перестройки tcr генов.

Наличие клона клеток с хромосомной аномалией может рассматриваться как доказательство неоплазии, однако, неудача в выявлении кариотипически аномального клона не может исключать ее наличие. Среди гемопоэтических неоплазий не существует форм, для которых бы не были известны случаи отсутствия цитологически регистрируемых хромосомных аномалий. Даже для хронического гранулоцитарного лейкоза, который почти всегда связан с появлением Ph хромосомы, известны случаи отсутствия хромосомных перестроек, идентифицируемых на микроскопическом уровне. То же можно сказать про лимфому Беркитта и острую промиелоцитную лейкемию. Можно предположить, что в этих случаях реорганизация генома происходит на субмикроскопическом уровне, или трансформированные клетки не входят в митоз в условиях, используемых при проведении цитогенетической диагностики.

Цитогенетический анализ может представить информацию о моменте, когда произошла клеточная трансформация. Имела ли она место в плюрипотентной стволовой клетке, способной дифференцироваться и в лимфоидном, и в миелоидном направлениях, или трансформация произошла в мультипотентной стволовой клетке, дальнейшая дифференцировка которой ограничена миелоидным рядом, или же в клетках, коммиттированных к моноцитной/гранулоцитной или лимфоцитарной дифференцировке. Выявлена достаточно тесная связь между определенными хромосомными нарушениями и мутациями в определенных типах стволовых клеток. Обнаружение таких хромосомных аномалий может рассматриваться как указание на клеточную трансформацию, произошедшую в стволовых клетках определенного
иерархического уровня. Показано, что при хронических гранулоцитных лейкемиях Ph хромосома присутствует во всех миелоидных производных, эритроидных сериях, мегакариоцитах, гранулоцитах (нейтрофилах, эозинофилах и базофилах) и моноцитах, макрофагах. При лимфобластной трансформации Ph хромосома присутствует также в В-лимфобластах. Это указывает на прохождение основного лейкемиегенного события в плюрипотентных стволовых клетках, которые во время хронической стадии могут дифференцироваться в миелоидные клетки. В отдельных случаях Т-лимфобластной трансформации Ph хромосома встречается также в Т-лимфобластах.

Цитогенетические исследования миелоидных диспластических синдромов позволяют предполагать, что они являются следствием преимущественно трансформации мультипотентных стволовых клеток. Однако, известны, по крайней мере, два случая, когда результаты хромосомного анализа указывают на трансформацию плюрипотентных клеток: хромосомные аномалии присутствуют как в В-лимфоцитах, так и в клетках миелоидного ряда.