Научная электронная библиотека

Монографии, изданные в издательстве Российской Академии Естествознания

4.4. Влияние гидролизата из тканей гидробионтов на экспрессию активационных мембранных молекул лимфоцитов периферической крови

В НИИЭМ СО РАМН под руководством д.м.н. Т.С. Запорожец были проведены исследования по влиянию гидролизата из тканей гидробионтов на экспрессию активационных мембранных молекул лимфоцитов периферической крови. Воспаление относится к числу наиболее распространенных патологических процессов и, являясь реакцией организма на местное повреждение, представляет собой сложное переплетение различных нервных, гуморальных и эффекторных механизмов, лежащих в основе большого числа воспалительных феноменов (альтерации, расстройств микроциркуляции с экссудацией и эмиграцией, пролиферации). Начальные стадии активационного процесса выражаются в запуске каскадных механизмов (чаще всего ферментных), конечной целью которых является экспрессия соответствующих генов. Продукты некоторых генов, связанных с активацией, появляются в различные сроки на поверхности лимфоцитов (Ярилин А.А., 1999). Таким образом, процесс активации сопровождается появлением, а чаще увеличением количества на внешней мембране лимфоцитов определенного набора эссенциальных, т.е. обязательных для данного функционального состояния клетки молекул. Это так называемые маркеры активации или «активационные» антигены. Комплекс активных антигенных пептидов и молекул HLA 2 класса с рецептором CD4 + Т-лимфоцита является сигналом, «запускающим» всю последующую иммунную реакцию с выработкой цитокинов, активированием новых количеств макрофагов и лимфоцитов, мобилизацией нейтрофилов, продукцией специфических антител. Формирование комплекса рецептора лимфоцита (TCR-CD3) с антигенными пептидами и молекулой главного комплекса гистосовместимости (HLA-DR) служит одним из основных стимулов для дальнейших активационных процессов в иммунокомпетентных клетках. Часть из активационных молекул исходно отсутствует на поверхности лимфоцитов, и их экспрессия индуцируется в процессе обмена сигналами. Важными маркерами активации лимфоцитов является экспрессия рецепторов интерлейкина-2 (CD25), трансферрина (CD71), антигена CD95, опосредующего апоптоз. Последний появляется на поверхности клеток, свидетельствуя о предстоящем удалении лимфоцитов, выполнивших свою функцию. CD69 – ранний маркёр активации, вовлечен в ранние механизмы активации Т-клеток, ЕК-клеток, моноцитов и тромбоцитов, формирует димеры, которые могут функционировать как трансдуктор сигнала, усиливая клеточную активацию. Экспрессируется в повышенных количествах на Т-клетках из воспалительных инфильтратов при ревматоидном артрите, вирусных гепатитах, аутоиммунных заболеваниях щитовидной железы.

Модулируя выраженность на клеточной поверхности активационных антигенов, можно достичь направленного изменения состояния активации иммунокомпетентных клеток, опосредующих развитие воспаления.

Лимфоциты периферической крови здоровых доноров выделяли на градиенте плотности фиколл-верографина (d = 1,077), отмывали забуференным фосфатно-солевым буфером и доводили до концентрации 2∙106 /мл средой RPMI-1640, содержащей 10 % эмбриональной телячьей сыворотки. Жизнеспособность выделенных клеток, по данным теста на окрашиваемость трипановым синим, составляла 95–98 %. Взвесь лимфоцитов помещали в силиконированные пробирки, «Артрофиш» вносили в конечной концентрации 10 мкг/мл и 100 мкг/мл и инкубировали в течение 24 часа в СО2-инкубаторе при температуре 37 °С. Экспрессию мембранных молекул определяли методом проточной цитометрии с использованием моноклональных антител, меченных флюоресцеин-изотиоционатом и фикоэритрином к антигенам CD25, CD38, CD71, CD69, CD16, CD95.

Относительное содержание лимфоцитов периферической крови здоровых доноров, экспрессирующих ранние активационные маркеры (CD25, CD71, CD38, CD69) составляло 10,7 ± 1,2 %, 6,7 ± 0,8 %, 36,0 ± 2,4 %, 10,5 ± 1,4 % соответственно.

Внесение в культуру лимфоцитов периферической крови гидролизата из тканей гидробионтов в конечной концентрации 10 и 100 мкг/мл приводило к уменьшению экспрессии ранних активационных антигенов (табл. 14).

Таблица 14

Изменение экспрессии ранних активационных антигенов под действием гидролизата из тканей гидробионтов

Снижение экспрессии активационных антигенов определяет изменение функциональной активности иммунокомпетентных клеток, а способность к их модуляции – лежит в основе механизма противовоспалительного действия гидролизата из тканей гидробионтов.

Таким образом, БАД к пище «Артрофиш», полученный из хрящевой ткани гидробионтов, обладает умеренной противовоспалительной активностью, снижает уровень экспрессии ранних активационных антигенов лимфоцитов периферической крови человека.