Научная электронная библиотека

Монографии, изданные в издательстве Российской Академии Естествознания

ПАРАТГОРМОН-РОДСТВЕННЫЙ ПРОТЕИН. 2-е издание переработанное и дополненное

Курзанов А. Н., Ледванов М. Ю., Быков И. М., Медведев В. Л., Стрыгина Е. А., Бизенкова М. Н., Заболотских Н. В., Ковалев Д. В., Стукова Н. Ю.,

1.2.2.3. Сигнальные пути трансдукции рецептора PTH2R

Передача сигнала через PTH2R изучена, менее детально чем сигнальная трансдукция через PTH1R. Стимуляция рецепторов PTH2R вызывает увеличение внутриклеточного свободного кальция. Активация PTH2R в стабильно трансфицированных клеточных линиях HEK-293 (Behar V. et al., 1996) и в клетках COS-7 (Della Penna K. et al., 2003; Hoare S.R. et al., 1999; Hoare S.R. et al., 2000a; Usdin T.B. et al., 1995; Usdin T.B. et al., 1999b) приводит к накоплению цАМФ. Стимулируемое TIP39 увеличение Ca²⁺ характеризуется первоначальным быстрым началом с пиком примерно через 20 секунд, за которым следует быстро уменьшающаяся вторичная фаза и возврат к базовому уровню в течение 80 секунд (Della Penna K. et al., 2003). Это увеличение Ca²⁺ сохраняется в среде без кальция, что свидетельствует о том, что увеличение Ca²⁺ в ответ на TIP39 поступает в основном из внутриклеточных структур. Активность TIP39 ниже при увеличении Ca²⁺, чем при увеличении цАМФ, что указывает на то, что PTH2R более слабо связан с увеличением Ca²⁺, чем с увеличением накопления цАМФ. Кроме того, путь передачи сигнала PTH2R зависит от агониста. Хотя человеческий PTH2R может активироваться как TIP39, так и ПТГ, результирующая передача сигналов цАМФ и внутриклеточного Ca различна (Bisello A. et al., 2004). Стимуляция образования цАМФ ПТГ короткая и быстро восстанавливает чувствительность, ответ на TIP39 является устойчивым и остается частично сниженным в течение длительного периода. Кроме того, TIP39 индуцирует мобилизацию бета-аррестина и протеинкиназы C-бета, десенсибилизацию PTH2R и интернализацию рецептора, тогда как ПТГ этого не делает (Bisello A. et al., 2004). Влияние ПТГ на PTH2R также отличается от воздействия на PTH1R, где ПТГ способствует активации фосфолипазы C/PKC, трафику аррестина, рецепторному эндоцитозу и десенсибилизации как Gs-, так и Gq-передачи сигналов (Castro M. et al., 2002; Ferrari S. et al., 1999; Ferrari S.L. and Bisello A., 2001). Эти данные свидетельствуют о том, что ПТГ и TIP39 могут влиять на разные физиологические активности через PTH2R человека. Человеческий TIP39 (hTIP39) практически не проявлял активности в отношении PTH1R человека или крысы, экспрессируемых в клетках COS-7 или HEK293 (Hansen I.A. et al., 2002; Usdin T.B. et al., 1999b). Кроме того, хотя hTIP39 является сильнодействующим агонистом PTH2R рыбок данио, он не индуцировал активации PTH1R или PTH3R рыбок данио. Тем не менее, было обнаружено, что hTIP39 связывает с умеренным сродством человеческий рецептор PTH1R (Jonsson K.B. et al., 2001). Кроме того, hTIP39 обладает умеренным сродством к PTH3R рыбок данио, приблизительно равным сродству к PTH1R человека (Hoare S.R. et al., 2000b).

Данные нескольких групп исследователей, использующих различные комбинации внутриклеточного анализа кальция и цАМФ, а также рецепторов и клеточных линий, согласуются (Della Penna K. et al., 2003; Hoare S.R. et al., 1999; Hoare S.R. et al., 2000a; John M.R. et al., 2002; Usdin T.B. et al., 1999b). Подобно PTH2R млекопитающих, PTH2R рыбок данио (zPTH2R) мощно активируется zTIP39, а также человеческим TIP39. Связывание лигандов с PTH2R человека и крысы согласуется с функциональными анализами. PTH2R человеа обладает несколько большей селективностью в отношении крысиного ПТГ (1–34) по сравнению с человеческим ПТГ (1–34), и оба лиганда значительно слабее связываются PTH2R крысы и агонистами zPTH2R рыбок данио (Hoare S.R. et al., 2000b; Papasani M.R. et al., 2004).