Научная электронная библиотека
Монографии, изданные в издательстве Российской Академии Естествознания

3.1. Влияние локального применения эпидермального фактора роста на количественный состав лейкоцитов, популяционный спектр и показатели апоптоза лимфоцитов периферической крови у больных с термической травмой

Опытной группе наряду с комплексным лечением местно проводили перевязки с препаратом «Эбермин», где в качестве активных веществ присутствуют эпидермальный фактор роста и сульфадиазин серебра. Контрольной группе взамен этого применяли влажновысыхающие повязки с препаратом «Сульфаргин», мазь для наружного применения (МНН: сульфадиазин серебра, АО Таллиннский фармацевтический завод, Эстонская Республика). Относительное содержание сульфадиазина серебра в препаратах «Эбермин» и «Сульфаргин» одинаковое – 1 %. Перевязки проводились с 1 суток ТТ под марлевые повязки. При использовании марлевых салфеток и атравматичных сетчатых покрытий перевязки проводились 1 раз в 2–3 дня, при бесповязочном методе лечения – ежедневно.

Следует учитывать, что сульфадиазин серебра обладает самостоятельным противомикробным действием в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий (Escherichia coli, Proteus spp., Staphylococcus spp., Klebsiella spp.), а также грибов Candida spp. и дерматофитов, умеренной осмотической активностью. Совместное использование сульфадиазина серебра и ЭФР рассматривается как вариант потенцирования протекторных эффектов последнего [102].

Количественный состав лейкоцитов в периферической крови у больных с термической травмой в условиях локального применения ЭФР представлен в табл. 24 и 25. На 10 сутки наблюдения в периферической крови как в абсолютных, так и в относительных величинах снижается содержание нейтрофилов за счет палочкоядерных и сегментоядерных форм, повышается содержание лимфоцитов. Однако, количество нейтрофилов и лимфоцитов не достигает уровня здоровых людей, сохраняется нейтрофильный лейкоцитоз и лимфоцитопения, но их выраженность значимо уменьшается.

При исследовании популяционного спектра лимфоцитов на 10 сутки после ТТ установлено повышение содержания CD3+, CD4+, CD8+, CD22+ (табл. 26). Причем, количество цитотоксических Т-лимфоцитов (CD8 +) и В-лимфоцитов (CD22+) достигало значений здоровых людей.

На 20 сутки после термической травмы локальное применение ЭФР приводило к значимому снижению общего содержания нейтрофилов в периферической крови. В целом, на данном этапе наблюдения количество лейкоцитов, лейкоцитарная формула, а также представительство популяций лимфоцитов не отличались от соответствующих показателей группы здоровых людей.

Одним из механизмов увеличения общего количества лимфоцитов и их субпопуляций в периферической крови у больных на 10 сутки после термической травмы является снижение интенсивности апоптоза. Результаты влияния локального применения эпидермального фактора роста на показатели апоптоза лимфоцитов у больных с термической травмой представлены в табл. 27. Так, на 10 сутки наблюдения уменьшалось относительное содержание лимфоцитов, экспрессирующих маркер готовности к запрограммированной гибели (CD95+), снижалось абсолютное количество лимфоцитов, несущих морфологические признаки апоптоза. На 20 сутки после термической травмы снижалось относительное и абсолютное количество лимфоцитов, имеющих как признаки готовности к апоптозу, так и структурные изменения ядра.

Таблица 24

Влияние локального применения эпидермального фактора роста на количественный состав лейкоцитов периферической крови у больных с термической травмой (М ± m)

Группы

 

 

Показатели

Группа 1

Здоровые

n = 30

Группа 3к

ТТ
10 сутки

n = 30

Группа 3о

ТТ + ЭФР

10 сутки n = 30

Группа 4к

ТТ
20 сутки

n = 30

Группа 4о

ТТ + ЭФР

20 сутки n = 30

Эозинофилы, %

1,33 ± 0,18

0,50 ± 0,18

р 1-3к < 0,01

1,18 ± 0,26

 

0,78 ± 0,29

р 1-4к < 0,05

0,75 ± 0,17

р 1-4о < 0,05

Нейтрофилы п/ядерные, %

2,50 ± 0,18

11,30 ± 0,51

р 1-3к < 0,001

8,18 ± 0,82

р 1-3о < 0,001

р 3к-3о < 0,01*

6,44 ± 0,35

р 1-4к < 0,001

6,50 ± 0,68

р 1-4о < 0,01

Нейтрофилы с/ядерные, %

59,08 ± 0,96

64,70 ± 0,73

р 1-3к < 0,01

56,00 ± 1,79

р 3к-3о < 0,01*

60,11 ± 0,82

59,50 ± 0,91

р 1-4о < 0,01

Нейтрофилы, %

61,58 ± 0,99

76,00 ± 0,80

р 1-3к < 0,001

64,18 ± 1,33

р 1-3о < 0,001

р3к-3о < 0,01

66,56 ± 0,72

р 1-4к < 0,01

 

66,00 ± 1,10

р 1-4о < 0,01

Лимфоциты, %

32,08 ± 0,79

18,50 ± 0,61

р 1-3к < 0,001

28,91 ± 1,14

р1-3о < 0,001

р 3к-3о < 0,01

29,11 ± 0,84

р 1-4к < 0,01

 

29,50 ± 0,93

р 1-4о < 0,01

Моноциты, %

5,00 ± 0,46

5,00 ± 0,51

5,73 ± 0,54

4,00 ± 0,28

3,75 ± 0,63

Примечание. р – показатель различия между группами по критерию Манна-Уитни (* – критерию Вальда-Вольфовитца).

Таблица 25

Влияние локального применения эпидермального фактора роста на количественный состав лейкоцитов периферической крови у больных с термической травмой (М ± m)

  Группы     

Показатели

Группа 1

Здоровые

n = 30

Группа 3к

ТТ

10 сутки

n = 23

Группа 3о

ТТ + ЭФР 10 сутки

n = 13

Группа 4к

ТТ 20 сутки

n = 23

Группа 4о

ТТ + ЭФР 20 сутки

n = 13

Лейкоциты, •109

5,33 ± 0,29

8,35 ± 0,47

р 1-3к < 0,001

9,05 ± 1,05

р 1-3о < 0,001

6,80 ± 0,53

р 1-4к < 0,05

6,60 ± 0,63

Эозинофилы, •109

0,07 ± 0,01

0,04 ± 0,01

0,12 ± 0,03

0,05 ± 0,02

0,05 ± 0,01

Нейтрофилы п/ядерные, •109

0,13 ± 0,01

0,95 ± 0,07

р 1-3к < 0,001

0,78 ± 0,13

р 1-3о < 0,001

р 3к-3о < 0,01*

0,45 ± 0,04

р 1-4к < 0,001

0,43 ± 0,07

р 1-4о < 0,01

Нейтрофилы с/ядерные, •109

3,13 ± 0,18

5,43 ± 0,34

р 1-3к < 0,001

5,12 ± 0,63

р 1-3о < 0,05

р 3к-3о < 0,01*

4,12 ± 0,35

р 1-4к < 0,05

3,88 ± 0,33

р 4к-4о < 0,01*

Нейтрофилы, •109

3,26 ± 0,19

6,38 ± 0,39

р 1-3к < 0,001

5,90 ± 0,74

р 1-3о < 0,01

р 3к-3о < 0,01*

4,56 ± 0,38

р 1-4к < 0,001

4,31 ± 0,38

р 1-4о < 0,01

Лимфоциты, •109

1,69 ± 0,09

1,53 ± 0,09

р 1-3к < 0,01*

2,50 ± 0,25

р 1-3о < 0,001

р 3к-3о < 0,001

1,96 ± 0,14

1,97 ± 0,21

Моноциты, •109

0,27 ± 0,03

0,40 ± 0,04

р 1-3к < 0,01

0,52 ± 0,08

р 1-3о < 0,01

0,28 ± 0,04

0,27 ± 0,07

Примечание. р – показатель различия между группами по критерию Манна–Уитни (* – критерию Вальда-Вольфовитца).

Таблица 26

Влияние локального применения эпидермального фактора роста на популяционный спектр лимфоцитов у больных
с термической травмой

Группы

 

 

Показатели

Группа 1

Здоровые

n = 30

Группа 3к

ТТ

10 сутки

n = 30

Группа 3о

ТТ + ЭФР

10 сутки

n = 30

Группа 4к

ТТ

20 сутки n = 30

Группа 4о

ТТ + ЭФР

20 сутки

n = 30

CD3+, %

67,00 ± 0,25

60,10 ± 1,38

р 1-3к < 0,001

62,64 ± 0,93

р 1-3о < 0,01

62,13 ± 1,00

р 1-4к < 0,001

55,13 ± 1,76

р1-4о < 0,001

р 4к-4о < 0,001

CD3+, •109

1,24 ± 0,09

0,93 ± 0,06

р 1-3к < 0,001

1,57 ± 0,16

р 1-3о < 0,01 *

р 3к-3о < 0,001

1,19 ± 0,10

р 1-4к < 0,01 *

1,05 ± 0,09

р 1-4о < 0,01*

CD4+, %

36,65 ± 0,65

34,90 ± 1,11

36,91 ± 0,48

36,13 ± 0,24

32,13 ± 1,11

р 1-4о < 0,01

р 4к-4о < 0,01

CD4+, •109

0,65 ± 0,06

0,54 ± 0,04

р 1-3к < 0,01

0,93 ± 0,09

р1-3о < 0,01 *

р 3к-3о < 0,001

0,69 ± 0,06

0,61 ± 0,05

CD8+, %

25,30 ± 0,23

23,30 ± 0,38

р 1-3к < 0,01

24,45 ± 0,38

24,88 ± 0,58

22,88 ± 0,93

CD8+, •109

0,47 ± 0,03

0,36 ± 0,02

р 1-3к < 0,01

0,62 ± 0,07

р 3к-3о < 0,001

0,49 ± 0,05

0,43 ± 0,03

CD4/CD8

1,48 ± 0,02

1,50 ± 0,04

1,51 ± 0,01

1,46 ± 0,03

1,42 ± 0,03

CD22+, %

18,95 ± 0,76

20,34 ± 1,55

19,45 ± 0,36

18,50 ± 0,47

17,00 ± 0,26

CD22+, •109

0,35 ± 0,03

0,31 ± 0,02

р 1-3к < 0,01 *

0,48 ± 0,05

р 3к-3о < 0,01

0,35 ± 0,03

0,33 ± 0,03

CD16+, %

16,45 ± 0,52

20,30 ± 1,04

р 1-3к < 0,01

18,45 ± 0,86

19,00 ± 1,43

14,75 ± 0,59

р 4к-4о < 0,001

CD16+, •109

0,31 ± 0,03

0,30 ± 0,02

0,35 ± 0,05

0,37 ± 0,03

0,28 ± 0,02

CD25+, %

14,15 ± 1,58

13,30 ± 0,52

11,09 ± 0,22

р1-3о < 0,01

р 3к-3о < 0,01

11,25 ± 0,57

12,25 ± 0,82

CD25+, •109

0,28 ± 0,05

0,21 ± 0,02

0,28 ± 0,03

0,21 ± 0,02

0,22 ± 0,01

CD71+, %

8,67 ± 0,59

17,10 ± 0,73

р 1-3к < 0,001

14,27 ± 0,74

р 1-3о < 0,001

р 3к-3о < 0,01

14,00 ± 0,62

р 1-4к < 0,001

11,25 ± 0,49

р 4к-4о < 0,01

CD71+, •109

0,16 ± 0,02

0,27 ± 0,02

р 1-3к < 0,001

0,37 ± 0,05

р 1-3о < 0,01

р 3к-3о < 0,01 *

0,27 ± 0,03

р 1-4к < 0,01

0,22 ± 0,02

р 1-4о < 0,01

HLA-DR+, %

19,70 ± 0,83

19,40 ± 0,28

22,64 ± 0,67

р 1-3о < 0,01

р 3к-3о < 0,001

20,63 ± 0,31

19,63 ± 0,95

HLA-DR+, •109

0,37 ± 0,04

0,29 ± 0,02

0,58 ± 0,07

р 1-3о < 0,01

р 3к-3о < 0,001

0,39 ± 0,03

0,36 ± 0,02

Примечание. р – показатель различия между группами по критерию Манна–Уитни (* – критерию Вальда-Вольфовитца).

С использованием корреляционного анализа установлено, что по мере снижения количества лимфоцитов, несущих признаки готовности к апоптозу и имеющих морфологические признаки апоптоза, в крови увеличивается общее содержание лимфоцитов, CD3+, CD4+, CD8+ лимфоцитов на 10 сутки после термической травмы (табл. 28). Интересно, что значимых связей между показателями апоптоза лимфоцитов и содержанием CD22+ клеток не обнаружено, несмотря на увеличение количества последних в кровотоке. Кроме того, отсутствовали достоверные связи между содержанием лимфоцитов с признаками апоптоза и количеством лимфоцитов и их популяций на 20 сутки после термической травмы. Максимальный протекторный эффект локального применения ЭФР в отношении количества лимфоцитов в кровотоке обнаруживается на 10 сутки наблюдения.

Известны некоторые молекулярные механизмы антиапоптического действия ЭФР. В частности, в экспериментальных условиях in vitro показана способность ЭФР ингибировать апоптоз в клеточной линии кератиноцитов НаСаТ, индуцируемых фактором ФНО-α, опосредованно, через активацию экспрессии рецептора пролиферации пероксисом – β (PPAR–β) [178, 179, 308].

Таблица 27

Влияние локального применения эпидермального фактора роста на показатели апоптоза лимфоцитов у больных
с термической травмой (М ± m)

Группы

 

 

Показатели

Группа 1

Здоровые

n = 30

Группа 3к

ТТ

10 сутки

n = 30

Группа 3о

ТТ + ЭФР 10 сутки

n = 30

Группа 4к

ТТ

20 сутки

n = 30

Группа 4о

ТТ + ЭФР

20 сутки

n = 30

CD95+, %

10,45 ± 0,92

15,40 ± 0,79

р 1-3к < 0,001

9,64 ± 0,39

р3к-3о < 0,001

14,13 ± 0,51

Р 1-4к < 0,001

8,75 ± 0,60

р 4к-4о < 0,001

CD95+, •109

0,20 ± 0,03

0,24 ± 0,02

р 1-3к < 0,01

0,24 ± 0,03

0,27 ± 0,02

Р 1-4к < 0,01

0,17 ± 0,02

р 4к-4о < 0,01

Апоптоз, %

7,50 ± 0,66

11,20 ± 0,61

р 1-3к < 0,001

6,27 ± 0,42

8,63 ± 0,62

5,75 ± 0,48

р 4к-4о < 0,01

Апоптоз, •109

0,13 ± 0,01

0,17 ± 0,01

р 1-3к < 0,01

0,15 ± 0,02

р 3к-3о < 0,01*

0,17 ± 0,02

0,11 ± 0,02

р 4к-4о < 0,01

Примечание. р – показатель различия между контрольной (к) и опытной (о) группами (р; р) по критерию Манна–Уитни (* – критерию Вальда–Вольфовитца).

Итак, локальное применение ЭФР у больных с термической травмой приводит на 10 сутки наблюдения к частичному восстановлению количественного представительства в крови нейтрофилов, общего содержания лимфоцитов, а также CD3+, CD4+, CD8+, CD22+ лимфоцитов, увеличению количества лимфоцитов, несущих маркеры поздней активации (CD71+, HLA-DR+). Одним из механизмов восстановления количества лимфоцитов в периферической крови выступает ограничение их апоптоза.

Таблица 28

Корреляционная матрица показателей апоптоза лимфоцитов и показателями популяционного состава лимфоцитов в крови у больных на 10 сутки термической травмы в условиях локального применения эпидермального фактора роста

Показатели

апоптоза

Клетки

CD95+, %

CD95+, •109

Апоптоз, %

Апоптоз, •109

Лимфоциты, •109

R = –0,75

R = −0,37

R = –0,43

R = −0,09

CD3+, %

R = 0,14

R = 0,05

R = −0,35

R = −0,21

CD3+, •109

R = −0,02

R = −0,78

R = −0,01

R = −0,66

CD4+, %

R = −0,36

R = −0,08

R = −0,48

R = −0,23

CD4+, •109

R = 0

R = −0,75

R = 0,02

R = −0,69

CD8+, %

R = −0,21

R = −0,06

R = −0,39

R = −0,08

CD8+, •109

R = −0,06

R = −0,78

R = −0,09

R = −0,63

CD22+, %

R = −0,02

R = −0,10

R = −0,31

R = −0,29

CD22+, •109

R = −0,02

R = −0,17

R = −0,03

R = −0,25

CD16+, %

R = 0,02

R = −0,16

R = 0,11

R = −0,07

CD16+, •109

R = −0,11

R = −0,09

R = −0,29

R = −0,17

 


Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074