Научная электронная библиотека
Монографии, изданные в издательстве Российской Академии Естествознания
Патогенетическое обоснование применения эпидермального фактора роста при термической травме
Лихачева А. Г., Телешева Л. Ф., Долгушин И. И., Осиков М. В.,
3.3. Влияние локального применения эпидермального фактора роста на цитокиновый профиль крови и продукцию цитокинов мононуклеарами периферической крови у больных с термической травмой
Как было отмечено выше, у больных после термической травмы наиболее значимые изменения концентрации цитокинов отмечены на 10 и 20 сутки наблюдения, они включали повышение уровня ИЛ-1β, снижение ИФН-γ и эпидермального фактора роста. К 20 суткам после термической травмы содержание цитокинов значимо не отличалось от значений в группе здоровых людей. В связи с этим, нами исследован цитокиновый профиль крови на 10 сутки после термической травмы при включении в терапию местного применения эпидермального фактора роста (табл. 30).
Таблица 30
Концентрация цитокинов в сыворотке у больных с термической травмой в условиях локального применения эпидермального фактора роста (М ± m)
|
Группы
Показатели |
Группа 1 Здоровые n = 30 |
Группа 3к ТТ 10 сутки n = 30 |
Группа 3о ТТ + ЭФР 10 сутки n = 30 |
Группа 4к ТТ 20 сутки n = 30 |
Группа 4о ТТ + ЭФР 20 сутки n = 30 |
|
ИЛ-1β, |
78,76 ± 5,11 |
138,68 ± 11,85 р 1-3к < 0,001 |
103,82 ± 7,13 р 1-3о < 0,001 р 3к-3о < 0,001 |
87,28 ± 4,76 |
82,28 ± 4,11 |
|
ИЛ-4, |
1,75 ± 0,14 |
1,78 ± 0,12 |
1,37 ± 0,22 |
2,15 ± 0,17 |
1,99 ± 0,11 |
|
ИФН-γ, пг/мл |
14,05 ± 2,84 |
4,42 ± 0,62 р 1-3к < 0,01 |
8,86 ± 0,77 р 1-3о < 0,001 р 3к-3о < 0,001 |
11,18 ± 1,19 |
12,77 ± 1,00 |
|
ТФР-β1, пг/мл |
343,59 ± 35,58 |
417,93 ± 47,42 |
415,75 ± 97,31 |
276,12 ± 45,56 |
289,68 ± 56,47 |
|
ЭФР, |
134,08 ± 10,76 |
85,71 ± 8,53 р 1-3к < 0,001 |
95,32 ± 16,92 р 1-3о < 0,01 |
128,49 ± 10,09 |
111,92 ± 13,37 |
Примечание. р – показатель различия между контрольной (к) и опытной (о) группами (р3к-р3о; р4к-р4о) по критерию Манна–Уитни.
Обнаружено, что в этих условиях в сыворотке снижается концентрация ИЛ-1β, хотя его уровень и остается выше, чем в группе здоровых людей. Кроме того, статистически значимо повышается концентрация в сыворотке ИФН-γ, но он также не достигает нормальных значений. Заслуживает внимания факт отсутствия достоверных изменений концентрации ЭФР в сыворотке – это может свидетельствовать о том, что ЭФР, содержащийся в качестве действующего начала в препарате «Эбермин» и применяемый локально при перевязках у больных с термической травмой, не поступает в системный кровоток и не оказывает таким образом прямого системного действия.
Снижение концентрации ИЛ-1β как одного из основных провоспалительных цитокинов в сыворотке может свидетельствовать об ограничении альтеративных реакций, снижении площади вторичной альтерации, как следствие – уменьшение инфильтрации фагоцитами и их чрезмерной активации в очаге повреждения у больных с термической травмой. В тоже время, хорошо известно, что изменение уровня одного цитокина приводит к изменению содержания других, особенно входящих в одну функциональную группу. В связи с этим, можно предположить, что снижение концентрации ИЛ-1β в сыворотке может быть связано с уменьшением уровня других провоспалительных цитокинов, в частности ФНО-α, ИЛ-8 и др., что приведет к соответствующим эффектам на системном уровне: снижение миелопоэза в костном мозге, выраженности нейтрофильного лейкоцитоза в периферической крови, эмиграции лейкоцитов в очаг повреждения, продукции реактантов острой фазы в печени, интенсивности апоптоза клеток и др.
Полагаем, что одним из механизмов повышения концентрации ИФН-γ в сыворотке является восстановление количества и функциональной активности Т-лимфоцитов, в том числе CD4+, участвующих в продукции этого цитокина. Впрочем, нельзя исключить роль других факторов: изменение уровня эндогенной интоксикации, функциональной активности эндотелиоцитов и др. Установлено, что в условиях локального применения ЭФР у больных с термической травмой изменяется продукция цитокинов мононуклеарами периферической крови (табл. 31).
Так, отмечено значимое снижение продукции мононуклеарами ИЛ-1β, в среднем на 26 % от аналогичного показателя в контрольной группе, при этом синтез ИЛ-1β все же был выше, чем в группе здоровых людей. На правах тенденции повышалась способность мононуклеаров продуцировать ИФН-γ. У больных с термической травмой в условиях локального применения эпидермального фактора роста установлена статистически значимая средней силы прямая связь между концентрацией ИЛ-1β в сыворотке и его продукцией мононуклеарами периферической крови (коэффициент корреляции Спирмена R = 0,67; р < 0,05), статистически значимая слабая прямая связь между концентрацией ИФН-γ в сыворотке и его продукцией мононуклеарами периферической крови (коэффициент корреляции Спирмена R = 0,31; р < 0,05). Таким образом, уровень в сыворотке ИЛ-1β снижается по мере уменьшения его продукции мононуклеарами периферической крови, а концентрация ИФН-γ в сыворотке повышается по мере увеличения его продукции мононуклеарами периферической крови.
Таблица 31
Продукция цитокинов мононуклеарами периферической крови у больных с термической травмой в условиях локального применения эпидермального фактора роста (М ± m)
|
Группы
Показатели |
Группа 1 Здоровые n = 30 |
Группа 3к ТТ 10 сутки n = 30 |
Группа 3о
ТТ + ЭФР |
|
ИЛ-1β, пг/мл |
13,30 ± 1,30 |
27,62 ± 1,33 р 1-3к < 0,001 |
20,31 ± 2,92 р 1-3о < 0,01 р 3к-3о < 0,01 |
|
ИЛ-4, пг/мл |
1,66 ± 0,14 |
1,42 ± 0,10 |
1,29 ± 0,14 |
|
ИФН-γ, пг/мл |
5,03 ± 0,51 |
1,96 ± 0,32 р 1-3к < 0,001 |
3,54 ± 1,15 р 1-3о < 0,01 |
|
ТФР-β1, пг/мл |
517,09 ± 74,88 |
443,37 ± 39,05 |
525,69 ± 26,85 |
|
ЭФР, пг/мл |
74,84 ± 4,28 |
36,71 ± 5,97 р 1-3к < 0,001 |
49,38 ± 12,62 р 1-3о < 0,001 |
Примечание. р – показатель различия между контрольной (к) и опытной (о) группами (р3к-р3о) по критерию Манна-Уитни.
Для проверки высказанных выше предположений о роли изменения уровня исследуемых цитокинов в сыворотке в модуляции количественного состава лейкоцитов в крови, популяционного спектра лимфоцитов был применен корреляционный анализ. Результаты представлены в табл. 32. Демонстративны статистически значимые положительные средней силы и сильные связи между уровнем ИЛ-1β в сыворотке и концентрацией палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов и моноцитов, а также средней силы положительные связи между концентрацией ИФН-γ в сыворотке и количеством лимфоцитов, CD3+, CD4+, CD8+, CD71+, HLA-DR+ клеток. Это свидетельствует о том, что в условиях локального применения эпидермального фактора у больных с термической травмой количество нейтрофилов в крови снижается по мере уменьшения концентрации ИЛ-1β, а количество лимфоцитов, в том числе CD3 + , CD4 + , CD8+, CD71+, HLA-DR+, увеличивается по мере увеличения уровня ИФН-γ.
Таблица 32
Корреляционная матрица концентрацией ИФН-γ и ИЛ-1β и количеством популяций лимфоцитов в крови у больных
на 10 сутки термической травмы в условиях локального применения эпидермального фактора роста
|
Показатели |
ИЛ-1β, пг/мл |
ИФН-γ, пг/мл |
|
Лейкоциты, •109/л |
R = 0,29; р > 0,05 |
R = −0,12; р > 0,05 |
|
Нейтрофилы п/ядерные, •109/л |
R = 0,73; p < 0,05 |
R = −0,08; р > 0,05 |
|
Нейтрофилы с/ядерные, •109/л |
R = 0,69; p < 0,05 |
R = −0,04; р > 0,05 |
|
Нейтрофилы, •109/л |
R = 0,62; p < 0,05 |
R = −0,29; р > 0,05 |
|
Моноциты, •109/л |
R = 0,44; p < 0,05 |
R = −0,27; р > 0,05 |
|
Лимфоциты, •109/л |
R = −0,45; p < 0,05 |
R = 0,57; p < 0,05 |
|
CD3+, % |
R = 0,11; р > 0,05 |
R = 0,03; р > 0,05 |
|
CD3+, •109/л |
R = −0,07; р > 0,05 |
R = 0,54; p < 0,05 |
|
CD4+, % |
R = 0,14; р > 0,05 |
R = 0,13; р > 0,05 |
|
CD4+, •109/л |
R = −0,24; р > 0,05 |
R = 0,62; p < 0,05 |
|
CD8+, % |
R = 0,07; р > 0,05 |
R = 0,10; р > 0,05 |
|
CD8+, •109/л |
R = −0,29; р > 0,05 |
R = 0,52; p < 0,05 |
|
CD22+, % |
R = 0,06; р > 0,05 |
R = 0,24; р > 0,05 |
|
CD22+, •109/л |
R = −0,26; р > 0,05 |
R = 0,31; р > 0,05 |
|
CD16+, % |
R = 0,04; р > 0,05 |
R = 0,27; р > 0,05 |
|
CD16+, •109/л |
R = 0,07; р > 0,05 |
R = 0,24; р > 0,05 |
|
CD71+, % |
R = 0,47; p < 0,05 |
R = −0,23; р > 0,05 |
|
CD71+, •109/л |
R = −0,24; р > 0,05 |
R = 0,42; p < 0,05 |
|
HLA-DR+, % |
R = −0,09; р > 0,05 |
R = −0,14; р > 0,05 |
|
HLA-DR+, •109/л |
R = −0,25; р > 0,05 |
R = 0,32; p < 0,05 |
Примечание. R – коэффициент корреляции Спирмена. Полужирным шрифтом выделены значимые (p < 0,05) связи.