Научная электронная библиотека
Монографии, изданные в издательстве Российской Академии Естествознания

3.2. Биохимический состав механоактивированного биокомплекса лишайника с родиолой розовой

Был проведен хроматомасс-спектрометрический анализ фракции низкомолекулярных органических веществ механохимически активированных корней и корневищ Rhodiola rosea и смеси слоевищ лишайника рода Cladonia и Rhodiola rosea, в массовом соотношении 10:1, предварительно определенным, как оптимальное. Исследование образцов проводилось методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в сопряжении с масс-спектрометрией высокого разрешения с использованием высокоэффективного жидкостного хроматографа Agilent 1200, сопряженного с гибридным квадруполь-времяпролетным детектором
Agilent 6520.

Экстракцию проводили из 100 мг сухого вещества – родиолы механоактивированной и биокомплекса ягель:родиола механоактивированные. Кислотная (рН = 2,8, ортофосфорная кислота) экстракция в 60 % метаноле с 147 мМ хлоридом натрия в трех смена (12, 2 и 2 ч). Делипидизация н-гексаном, перевод в основания, переэкстракция дихлорметаном. Конечный объем 100 мкл раствора в 12 % ацетонитриле. Для анализа использовали разведение 1:100. На рис. 24 и 25 представлены хроматограммы. На рис. 24 – образец родиолы, на рис. 25 – биокмплекс ягель:родиола.

Биохимический состав двух образцов представлен в табл. 11 и 12. В табл. 11 – биохимический состав родиолы механоактивированной, в табл. 12 – ее биокомплекса с ягелем.

Анализ результатов показал, что фракция низкомолекулярных органических веществ механохимически активированных корней и корневищ родиолы розовой содержит 43 фракции, в том числе: 24 органические кислоты сложного строения, включая 2 гибберилина, относящихся к карбоновым кислотам тетрациклического дитерпеноидого строения; по 2 типа стероидных, спиртовых, азотсодержащих, сложноэфирных и пептидных соединения; 6 типов кетонов и 3 типа углеводородных молекул.

Фракция низкомолекулярных органических веществ механохимически активированной смеси слоевищ лишайника рода Cladonia (90 %) и родиолы розовой (10 %) естественно содержит большее количество соединений – 55, в том числе: 26 органических кислот сложного строения, 14 веществ стероидного строения; 1 тип спиртовых, 3 типа сложноэфирных, 5 – пептидных, 1 – азотсодержащих соединения, а также 4 типа кетонов и 1 тип углеводородных молекул.

Сравнение двух спектрограмм (рис. 24 и 25) показывает, что, во-первых, фракция низкомолекулярных органических веществ механохимически активированных слоевищ лишайника рода Cladonia содержит 40 фракций, в том числе: 15 органических кислот сложного строения, прежде всего усниновую кислоту, 12 типов стероидных молекул; монотерпеноидный спирт Eucalyptol, 3 типа сложных эфиров, 5 – типов трипептидных молекул, 3 типа кетонов, а также азотсодержащий гетероциклический гликолипид – цереброзид Psychosine. С содержанием последнего, по-видимому, связана способность препаратов лишайника модифицировать гликокаликс клеточных мембран, в том числе нейронов и клеток эндокринных органов, включая поджелудочную железу.

Таблица 11

Биохимический качественный состав Родиолы розовой механоактивированной

Dataβase: D:MassHunterdataβasesMetlin.mtl

Mass list file: D:MassHunterData2011-06–30YK002QRT02RT-r001.csv

Hits: 180

Numβer suβmitted: 664

Total hits: 268

Conflicting hits: 131

Single matches: 77

Masses: ±10 ppm Neutral

Retention times: ±0.1 min (Optional)

Radical ion search mode: Neutrals

Sample one after whole organic compounds acidic extration. Searching against metaβolites dataβase

№ п/п

Name

Formula

1

19-Norandrosterone

C18H28О2

2

cis, cis-stillingic acid

C10H16O2

3

Linolenic acid

C18H30O2

4

13-hydroperoxy-9,11E-octadecadienoic acid

C18H32О4

5

Gln Arg Glu

C16H29N7О7

6

13-Keto-octadeca-9Z,11E-dienoic acid

C18H30O3

7

(-)-trans-Carveol

С١0H16О

8

10-hydroxy-8E-Decene-2,4,6-triynoic acid

C10H18O3

9

(-)-Limonene

C10H16

10

ethyl 2-octenoate9-hydroperoxy-10E,12,15Z-octadecatrienoic acid

C10H18O2

11

9-hydroperoxy-12,13-epoxy-10-octadecenoic acid

C18H32О5

12

9-hydroxy-5Z-nonenoic acid

C9H16О3

13

Nandrolone

C18H26О2

14

thymol

C10H14O

15

2E,6E,8E-decatrienoic acid

C10H14O2

16

(-)-8-hydroxy-11E,17-octadecadien-9-ynoic acid

C18H28О3

17

11,12,13-trihydroxy-9-octadecenoic acid

C18H34О5

18

Giββerellin A8

C19H24О7

19

L-Leucine n-βutyl ester

C10H21NO2

20

9-hydroperoxy-10E,12,15Z-octadecatrienoic acid

C18H30O4

21

12-hydroxy-3Z,6Z-dodecadienoic acid

C12H20O3

22

Phe Gln Lys

C20H31N5O5

23

Capric acid

C10H20O2

24

2-Methyl-3’-hydroxyphenylpropionic acid

C10H12O3

25

8-hydroxy-13Z-octadecene-9,11-diynoic acid

C18H26О3

26

3-Carβoxy-2,4,4-trimethyl-2-cyclohexenone

C10H14O3

27

GlcNAcβeta1–3Galβeta1–4Glcβeta-Sp

C22H38N4О16

28

Giββerellin A51-cataβolite

C19H22О5

29

Traumatic acid

C12H20O4

30

9-oxo-2E-decenoic acid

C10H16O3

31

Ideβenone

C19H30O5

32

p-Cymene

C10H14

33

1alpha-fluoro-25-hydroxy-16,17,23,23,24,24 hexadehydrovitamin
D3 / 1alpha-fluoro-25-hydroxy-16,17,23

C27H37FО2

34

Uβiquinone

C14H18О4

35

2,5-Dimethoxycinnamic acid

C11H12О4

36

2,4,6,8-decatetraenal

С10H120

37

10-hydroxy-2E-decenoic acid

C10H8O3

38

2-Phenylβutyrolactone

C10H10O2

39

Phenylmethyl methyl ketone

C9H10O

40

12-oxo-14,18-dihydroxy-9Z,13E,15Z-octadecatrienoic acid

C18H28О5

41

GPA(19:3(10Z,13Z,16Z)/0:0)

C22H42NО7P

42

QH2

C19H28O4

43

Undecanedioic acid

C11H20O4

Таблица 12

Биохимический качественный состав биокомплекса ягель:родиола
розовая механоактивированная

Agilent METLIN Personal Dataβase Βatch Summary Results

Dataβase: D:MassHunterdataβasesMetlin.mtl

Mass list file: D:MassHunterData2011-06–30YK001QRT02RT-r001.csv

Hits: 191

Numβer suβmitted: 751

Total hits: 288

Conflicting hits: 152

Single matches: 62

Masses: ±10 ppm Neutral

Retention times: ±0,1 min (Optional)

Radical ion search mode: Neutrals

Sample one after whole organic compounds acidic extration. Searching against metaβolites dataβase

п/п

Name

Formula

1

Linoleic acid

C18H32О2

2

19-Norandrosterone

C18H28О2

3

9-hydroxy-12Z-octadecenoic acid

C18H34О3

4

Linolenic acid

C18H30O2

5

13-hydroperoxy-9,11E-octadecadienoic acid

C18H32О4

6

13-Keto-octadeca-9Z,11E-dienoic acid

C18H30O3

7

Vernolic acid

C18H32О3

8

Eucalyptol

С١0H18О

9

10-hydroxy-2E-decenoic acid

C10H18O3

10

2,3-dihydroxy stearic acid

C18H36О4

11

9-hydroperoxy-10E,12,15Z-octadecatrienoic acid

C18H30O4

12

methyl 9-hydroperoxy-10,12-epidioxy-13,15-octadecadienoate

C19H32О6

13

9-hydroxy-5Z-nonenoic acid

C9H16О3

14

Octadecanedioic acid

C18H34О4

15

(+/-)5,6-DiHETrE

C20H34O4

16

Dihydrotestosterone

C19H30O2

17

11,12,13-trihydroxy-9-octadecenoic acid

C18H34О5

18

(5Z,10Z)-19-fluoro-1alpha-hydroxyvitamin-D3 /{5Z,10Z)-19-fluoro-1alpha-hydroxycholecalciferol

C27H43FО2

19

19(R)-hydroxy-PGF1 alpha

C20H36O6

20

Lys Arg Thr

C16H33N7О5

21

(22R)-1alpha,25-dihydroxy-22-methoxy-26,27-dimethyl-23,23,24,24-tetradehydrovitamin D3 /{22R)-1alph

C30H46O4

22

9-hydroperoxy-12,13-epoxy-10-octadecenoic acid

C18H32О5

23

2-methyl-hexadecanedioic acid

C17H32О4

24

Tetrahydrocorticosterone

C21H34О4

25

Lys Ser Trp

C20H29N5O5

26

Tyr Lys Аrg

C21H35N7О5

27

His Val Lys

C17H30N6O4

28

12-hydroxy-3Z,6Z-dodecadienoic acid

C12H20O3

29

Ethinylestradiol

C20H24O2

30

4-Oxoisotretinoin

C20H26O3

31

2,3-Dinor-11â-PGF2á

C18H30O5

32

11-Hydroxyandrosterone

C19H30O3

33

Psychosine

C24H47NО7

34

Jasmonic acid

C12H18О3

35

12S-hydroxy-16-heptadecynoic acid

C17H30O3

36

3-methyl-tetradecanedioic acid

C15H28О4

37

9-hydroperoxy-12,13-dihydroxy-10-octadecenoic acid

C18H34О6

38

Traumatic acid

C12H20O4

39

5-(Tetradecyloxy)-2-furoic acid

C19H32О4

40

Hexadecanedioic acid

C16H30O4

41

Ldeβenone

C19H30O5

42

1(3)-glyceryl-PGF2alpha

C23H40O7

43

a-Methyl-3,4-dihydroxyphenylpropionic acid

С1OH12О4

44

(1R,2R)-3-oxo-2-pentyl-cyclopentanehexanoic acid

C16H28О3

45

Norethindrone

C20H26O2

46

(24R)-24-fluoro-1 alpha,25-dihydroxyvitamin D2 /{24R)-24-fluoro-1 alpha,25-dihydroxyergocalciferol

C28H43FО3

47

1alpha-fluoro-25-hydroxy-16,17,23,23,24,24-hexadehydrovitamin
D3 / 1alpha-fluoro-25-hydroxy-16,17,23

C27H37FО2

48

(-)-Usnic acid

C18H16О7

49

Lys Lys Lys

C18H38N6О4

50

Ideβenone Metaβolite (1,4-Βenzenediol, 2-(10-hydroxydecyl)-5,6-dimethoxy-3-methyl-)

C19H32О5

51

Dihydromethylsteriqmatocystin

C18H14О7

52

10-hydroxy-8E-Decene-2,4,6-triynoic acid

C10H8O3

53

p-Cymene

C10H14

54

Βenzyl βenzoate

C14H12О2

55

Phenylmethyl methyl ketone

C9H10O

Рис. 24. Хроматограмма экстракта биокомплекса ягель: родиола механоактивированного. Комментарий: Экстракция из 100 мг сухого вещества. Кислотная (рН = 2,8, ортофосфорная кислота) экстракция в 60% метаноле с 147 мМ хлоридом натрия в трех смена (12, 2 и 2 часа). Делипидизация н-гексаном, перевод в основания, переэкстракция дихлорметаном. Конечный объем 100 мкл раствора в 12% ацетонитриле. Для анализа использовали разведение 1:100

Рис. 25. Хроматограмма экстракта родиолы механоактивированной. Комментарий: Экстракция из 100 мг сухого вещества. Кислотная (рН = 2,8, ортофосфорная кислота) экстракция в 60% метаноле с 147 мМ хлоридом натрия в трех смена (12, 2 и 2 ч). Делипидизация н-гексаном, перевод в основания, переэкстракция дихлорметаном. Конечный объем 100 мкл раствора в 12% ацетонитриле. Для анализа использовали разведение 1:100


Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074